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有关ELISA不可忽视的“小问题”

人阅读 发布时间:2019-06-18 19:58

ELISA 试剂盒对科研朋友们,肯定不陌生,在科研领域,ELISA 试剂盒可是有一定知名度的。那在实验中,有哪些是需要注意的,有时候在实验中一不留神的小问题,可能都会酿成较大的麻烦哦,今天就给大家列举这些小细节哦!

1. 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯 yi 烯、聚苯 yi 烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是 40 孔聚苯 yi 烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。

2. 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如 OPD 等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如 TMB 和 ABTS 是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以 10~30 分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是 H2O2 在临用前加入。

3. 实验前,产品应保存在 2~8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

4. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

5. 通常在没有开封,试剂盒的有效期为 6 个月,但根据实验需求,试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余剂盒建议在首次实验后 1 个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。

每个试剂盒说明书中都是有其注意事项的,实验前记得仔细阅读,如果您想了解更多内容的话也可以来电我公司询问,我们把产品说明书发送给您。并且有任何疑问,我们都会为您解答。
 

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