百萤生物为您推荐的Calbryte™系列是最亮的荧光染料家族，具有最高的信噪比，用于监测细胞内钙离子变化。 它包括三种新的钙指示剂：Calbryte™520，Calbryte™590和Calbryte™630。今天带您了解Calbryte^TM 630

       Calbryte™630是我们对红色和深红色荧光指示剂（如X-Rhod-1）的升级。 该染料在608nm处具有最大激发，其与594nm激光线很好地对准。 该染料的最大发射波长为624 nm，与常见的Texas®Red滤光片组兼容。 由于其与光谱绿色区域的距离，Calbryte™630非常适合与绿色荧光标签（如iFluor™488，AlexaFluor®488或GFP）复用。 此外，Calbryte™630的长发射波长使其非常适合深部组织的研究。 这是因为较长波长的染料更容易穿透许多细胞层，而短波长染料则不能。

 

Calbryte^TM 630 钙离子检测试剂的特点

 

•与GFP兼容的红色钙离子指示剂

•X-Rhod-1和Cal-630™的优质替代品

•非常适合与绿色荧光的标签复用，如iFluor™488，AlexaFluor®488或GFP

图1使用Calbryte TM 630 AM （Cat＃20721）在CHO-K1细胞中测量ATP剂量反应。 将CHO-K1细胞以50,000个细胞/100μL/孔接种在96孔黑壁/透明底Costar板中过夜。 在丙磺舒的HH缓冲液中，加入100μL10μg/ mL Calbryte TM 630AM，并在37℃下孵育60分钟。 然后除去染料加载溶液并用200μLHH缓冲液/孔替换。 通过FlexStation®3添加ATP（50μL/孔）以达到最终指定浓度。

图2 CHO-K细胞内源性P2Y受体对ATP的反应。 将CHO-K细胞以40,000个细胞/100μL/孔接种过夜，置于96孔黑色壁/透明底板中。 将含有2mM丙磺舒的HHBS中的将100μLCalbryte^TM 630AM（Cat＃20721）加入孔中，并将细胞在37℃下孵育1小时。 用200μLHHBS替换染料加载溶液，用50μL50μMATP处理，并使用TexasRed®Channel用荧光显微镜（Keyence）成像。