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LBC整理ELISA试剂盒常见问题及处理
人阅读 发布时间：2018-07-17 11:03
 整理ELISA试剂盒常见问题及处理 |
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| 出现问题 | 出现问题的原因 | 解决办法 | |
| 曲 线 |
OD值不正常 |
试剂盒未回温 | 试剂盒回温到25℃ |
| 温度控制不好 | 控制正确温度 | ||
| 孵育时间不准确 | 控制孵育时间 | ||
| 洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加 | 洗涤4-5次，每孔250ul，然后拍干 | ||
| 阳光直射，对着风直接吹 | 避风避光 | ||
| 酶标仪的波长错误 | 酶标仪的波长450nm | ||
| 抗体的稀释错误 | 正确的稀释抗体 | ||
| 水质问题 | 用娃哈哈矿泉水代替 | ||
| 白 板 |
洗涤液配制错误 | 正确的配制洗涤液 | |
| 少加液体（抗体、酶标记物、A液、B液） | 正确的步骤加液体 | ||
| 错加液体 | |||
| 无 梯 度 |
标准品也污染 | 换标准品点板 | |
| OD值不正常 | 控制温度时间在做一次 | ||
| 人为点板 | / | ||
| 线 性 不 好 |
OD值不正常 | 控制温度时间在做一次 | |
| 人为点板 | / | ||
| 回 收 率 |
空白管阳性高 |
样本本身就是阳性样本 | 换阴性样本做回收率 |
| 空白管在实验中被污染 | 实验中防止交叉污染 | ||
| 水质原因 | 用娃哈哈矿泉水代替 | ||
| 偏 高 |
添加量不准确 | 精准的添加量 | |
| 添加浓度不适合 | 添加合适的浓度 | ||
| 取液吹干量多 | 准确的取液吹干 | ||
| 取到其它相层液体 | 取需用相吹干 | ||
| 复溶液未稀释或加入量少 | 正确的稀释复溶液 | ||
| 偏 低 |
添加量不准确 | 精准的添加量 | |
| 添加浓度不适合 | 添加合适的浓度 | ||
| 取液吹干量少 | 准确的取液吹干 | ||
| 复溶液稀释错误或加入量多 | 正确的稀释复溶液 | ||
| 假阴、阳性 |
水质原因 | 点复溶液验证 | 用娃哈哈矿泉水代替 |
| 实验操作原因 |
吸取到其它相吹干 | 准确的取液吹干 | |
| 离心不彻底 | 延长离心时间 | ||
| 样本的污染 | 更换样本 | ||
| 乳化未处理完全 | 温浴（70℃）处理乳化现象 | ||
| 仪器试剂原因 |
离心管未清洗干净 | 正确的洗涤器具 | |
| 有机溶剂的影响 | 做试剂空白看影响结果 | ||
| 衍生化试剂原因（长时间衍生化试剂变质） | 更换衍生化试剂 | ||
| 与曲线好坏相关 | 保证曲线的正常 | ||
| 金标检测（T）线颜色较浅 |
尿液pH偏碱性 | 用0.01M HCl调节尿液pH值到7.0左右。 | |
| 尿样滴加过多 | 重新测定，尿样按照说明书，控制在2滴 | ||
| 尿液过于混浊 | 将尿液离心后，取上清液重新测定 | ||
| 金标质控（C）线不出现 |
检测卡由于高温、受潮等原因失效 | 尿样需要重新检测。 | |
| 过了有效期失效。 | 该批号的金标应丢弃处理，尿液需要重新检测 |
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| 操作过程中检测卡没有平放，导致液体样品直接冲过检测区 | 尿样需要重新检测，且检测卡平放于桌面上再加样。 | ||
| 尿液样品中含有较高的抑制或者干扰抗原抗体反应的物质（比如明矾、小苏打、氧化剂、肌酐等） | 该尿液的检测结果无效 | ||
| 金标卡上在除了T和C线之外的其他地方出线 | 金标卡上的划痕；胶体金在跑板过程中没有完全跑干净而遗留在卡上的痕迹； | 该检测卡结果不可信，尿液需要重新检测。 | |
| 实验重复性不好 | 操作人员的不一致，取样的不一致，样本数量的多少，加样时间的长短，洗涤条件不一致，加样量不一致 | 尽量保持的实验一致性 |
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| 分析软件的使用 |
不能设置和保存 | 正确的设置和保存 | |
| 如何判断曲线的好坏和分析结果 | 正确的判断曲线的好坏和分析结果 | ||
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