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    淼灵质粒市场部

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    湖北 武汉市 洪山区

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    试剂、技术服务、耗材、医疗器械、实验室仪器 / 设备、原辅料包材、细胞库 / 细胞培养

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技术资料/正文

噬菌体展示技术发现抗体的流程

61 人阅读发布时间:2026-08-07 14:45

一、简介

从浆细胞中扩增抗体的H链和L链基因,并构建成文库,抗体片段群与噬菌体衣壳蛋白融合表达并展示于噬菌体表面,形成噬菌体展示抗体库。主要有三种类型: scFv库(由VH和VL组成,并由一个linker连接成一个单链多肽)、Fab库(含有VH-CH1&VL-CL,并由二硫键连接在一起)和VHH库(只有重链可变区针对驼科动物),针对不同筛选源设计合适的淘选方案,经过3-4轮富集,最终得到阳性克隆,经测序得到抗体序列。

技术资料图片1 

 

二、相较于传统抗体发现平台噬菌体展示的优势

技术 免疫血清 杂交瘤 噬菌体展示
抗体类型 多克隆抗体 单克隆抗体 重组抗体
抗体种类 / lgG(少数为其他类型) lgG,scFv,Fab,VHH等
物种 多种动物 大鼠小鼠 人和各种动物
宿主细胞 / 杂交瘤 细菌/293/CHO
筛选范围 / ≤103 107-1011
时间 几个月 几个月 几周
操作 简单 复杂 较简单
免疫 必须 必须 非必须
人源抗体 / / 可以
产量 有限 有限 可通过重组表达实现无限产量
基因获取 / 再克隆后杂交瘤测序,此过程基因容易丢失 直接测序
实验重复性 无法重复 无法重复 有原始库即可重复
发展前景 有限 有限 十分广阔

 

三、物种&抗体介绍

1.The antibody of camelidae

羊驼体内既有单域重链抗体(IgG2b,IgG2c),又有传统抗体IgG1;绝大多数情况下,选择羊驼开发抗体,只关注到单域重链抗体,忽视了IgG1抗体

Alpaca:IgG1a,IgG1b,IgG2b,IgG2C

Llama:IgG1a,IgG1b,IgG2b,IgG2C

Camel:IgG1a,IgG1b,IgG2a,IgG2c,IgG3

 

  骆驼(camel) 羊驼(alpaca) 大羊驼(llama)
单域抗体含量 单域抗体约70% 单域抗体约25~45% 单域抗体25%~45%
分子内二硫键 分子内二硫键80% 分子内二硫键35% 分子内二硫键20%
人源化程度 65~70% 80%以上 80%以上

技术资料图片2技术资料图片3技术资料图片4 

 

2.The antibody from shark

IgNAR的重链含有1个可变区和5个恒定区, 可变区通过类似铰链区结构与恒定区相连, 一个柔性接头,连接FR2和FR3,且对CDR1和CDR3的支撑作用不明显。

技术资料图片5 

 

3.The antibody of Human

技术资料图片6 

人体内主要有4种抗体IgM,IgG, IgE,IgA,其中IgD不能(未被发现)做抗体.

lIgM是初级抗体,负责对新抗原快速普遍的压制,抗原亲和力较低

lIgG是最普遍的血清抗体,亲和力高功能多,可以激活多重免疫细胞,也可以穿越胎盘保护胎儿

lIgE是寄生虫/过敏原抗体,这里的寄生虫主要指蠕虫/弓形虫等动物

lIgA是粘膜抗体,会穿过粘膜组织保护相关器官,如肺,肠胃等,在乳汁中也常见 用以保护免疫力尚未发育完全的婴儿的健康

 

四、淼灵优势资源

l 有成熟的文库构建体系。可构建scFv库、Fab库、VHH库。

l 可根据客户不同要求构建不同类型,不同物种的文库。

l 有完善的一套生物淘选的流程。可根据筛选源性质不同设计不同的淘选方案。

l 拥有自己的千亿级天然人源重组抗体库(1011)、百亿级天然纳米抗体库(1010)。

 

五、人源天然库QC鉴定

对构建完成的库中挑选了600多个单克隆进行测序,并分析汇总得到以下结果:

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资料格式:

淼灵质粒宣传手册.pdf

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