质粒转化步骤

一、操作步骤：
1. 从-80℃冰箱中取出对应的感受态细胞，室温下置于冰盒上解冻，标记;

2. 向感受态细胞中加入2µl的质粒，置于4℃冰箱中,冰浴30min;

3. 在42℃水浴锅中热激1min，然后立即在冰盒上放置2min；

4. 每管加900µl  LB培养基，37℃摇床震荡,150rpm×45min；

5. 取100µl 转化液加入对应抗性的平板中，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；

6. 将平板倒置于37℃恒温培养箱中培养过夜。

二、注意事项：
1. 感受态可用灭菌的离心管分装使用。

2. 根据需要在第5步骤时将转化液6000rpm离心3min，然后只留下100µl左右的上清液，混匀沉淀，全部加入相对应的平板中

3. 转化过程在超净工作台中进行。

4.质控标准：不要长太小 太密或培养时间过长，菌体大小适中 对着光看饱满透亮，平板不要长太多卫星菌落