利用细胞原位分子互作技术(仪)SPRm200探索肿瘤细胞表面糖密码

背景介绍

糖基化失调,包括N-糖链分支增加、O-糖链缩短和高度唾液酸化，是癌细胞的典型特征,创造了一个独特的"糖密码"。这种糖密码可被糖结合蛋白(又称lectin)识别和结合。

实验内容

该实验使用细胞原位分子互作技术(仪)SPRm200研究了两种lectin - 小麦胶凝素(WGA)和接骨木糖(SNA) - 与胰腺癌细胞(BxPC3)表面糖苷的实时结合动力学。

图 1 胰腺癌细胞表面糖基化异常和两种不同凝集素的结合位点示意图

图 2 使用 SPRm 200 对 BxPC3 细胞进行动力学相互作用分析：(A) 从响应性 ROI 中提取的亲和力等温线图，显示 SNA 凝集素与 BxPC3 细胞上的聚糖结合，单一群体红色标记显示。(B) SNA凝集素动力学参数直方图统计与高斯分布拟合，以提取细胞群体平均值和 95% 置信区间。(C) 从响应性 ROI 中提取的亲和等温线图，显示 WGA 凝集素与 BxPC3 细胞中的聚糖结合相互作用，两个不同的群体以蓝色和绿色标记显示。(D) WGA凝集素动力学参数直方图统计与高斯分布拟合，以提取细胞群体平均值和 95% 置信区间。

表 1 凝集素与 BxPC3 胰腺细胞结合的总结

结果

SPRm200允许无标记、实时检测单个细胞上lectin-糖苷相互作用,提供了这些相互作用的细节和异质性结合信息。数据显示，与WGA结合到N-乙酰氨基葡萄糖和唾液酸残基的更为异质化的动力学相比，SNA与末端半乳糖连接的唾液酸有更高的结合亲和力和选择性。

SPRm200能够生成亲和力等温线图和动力学参数分布，揭示了复杂的多模式lectin-糖苷相互作用，这是传统的终点法测量或亲和力测量技术所无法观察到的。

讨论

了解这些lectin-糖苷详细的相互作用机制，对于推进我们对肿瘤细胞表面糖基化修饰的认知及其在癌症发生中的生物学作用，甚至为开发新的诊断和治疗方法均能提供至关重要的信息。

SPRm 200 系列

基于细胞原位分子互作技术(仪)SPRm200集成了光学显微镜和SPR，是一种可用于细胞原位测量膜蛋白结合活性的强大技术。它允许通过明场测量样品的表型变化，同时通过 SPR 测量结合强度和动力学。

关键特点

• 细菌或病毒代谢活性或纳米粒子的结合活性，药物递送设计研究。

• SPR 光学显微镜，一台仪器中集成明场成像和SPR检测。

• 大视野，高分辨率光学元件，可观察单个或多个细胞。

• 体外、无标记结合活性映射，提供单个细胞原位的SPR传感图、结合活性图以及结合动力学常数 (ka、kd、KD)。

   

  了解更多SPRm 200信息，可点击链接观看：

• 【SPRM细胞膜蛋白原位分子互作分析系统】 https://b23.tv/g2eoEMi

• 【BI webnair 】 https://b23.tv/aS00RX0