单克隆抗体（简称单抗）广泛用于疾病的诊断、预防和治疗。自1986年首个单抗药物上市以来，已有近40种单抗药物上市，还有300多种单抗处于临床研究中。单抗药物已成为全球发展最快的药物领域之一，近10年单抗药物行业的复合增长率高达50%，2011年市场规模达到628亿美元，预计2015年有望达到980亿美元。
在单抗药物的生产过程中，对分离纯化工艺的效率和成本的要求非常高，单抗的分离纯化成本通常可占其生产成本的50-70%。Protein A亲和介质是抗体分离纯化最关键的材料，其性能和成本决定了单抗产品的纯度和收率和成本。目前，约70-80%的抗体纯化都采用基于Protein A亲和层析的纯化工艺。
Protein A来源于金黄色葡萄球菌的一个株系，它含有5个可以和抗体IgG分子的Fc段特异性结合的结构域。将Protein A偶联至基质上（如琼脂糖和聚合物微球等），可以与抗体特异性结合，选择性极高，一步亲和层析后抗体的纯度往往可达到95%以上。一个Protein A分子通常可以结合2个IgG分子。Protein A还可以结合其他免疫球蛋白，如IgA和IgM。与天然Protein A相比，重组蛋白rProtein A对IgG的Fc片段有着相似的特异结合能力，其C末端经改造后含有一个半胱氨酸，可以与基质发生定点偶联，提高配基与IgG的结合能力。此外，对天然Protein A进行耐碱性改造，改造后的配基含有多个与IgG结合的结构域，洗脱条件更为均一和温和，并具有优异的耐碱性能。
目前市场上的Protein A介质，其基质主要以高流速琼脂糖基质为主。琼脂糖微球具有亲水性好、非特异性吸附低、抗体回收率高等优点。亲和配基从最初的天然Protein A（nProtein A）发展到重组Protein A（rProtein A），偶联方式也从最初的随机偶联发展到目前的定点偶联，无论是配基稳定性，还是结合抗体的能力，都有了显著的提升。在选择Protein A层析介质时，需要结合目标抗体的性质进行。对于高表达量的单抗来说，选择高载量的Protein A介质是降低成本、提高纯化效率的明智选择。此外，考虑到药物GMP生产的无菌、无热源要求，在操作中经常需要使用NaOH清洗，以便去除残留在层析介质上的杂质和热源，因此，优异的耐碱性能对于Protein A介质也尤其重要。
国家生化工程技术研究中心（北京）和中科森辉微球技术（苏州）有限公司开发的耐碱Protein A亲和介质，采用高流速琼脂糖为基质，以重组耐碱Protein A为配基，并采用定点偶联的方法进行配基偶联，所制备的介质具有高流速、高载量和优异的耐碱性能，可满足您在单抗及相关制品开发中的一切需要求。
 
表1 耐碱Protein A介质的理化性质和产品特性

参数	指标
基质	4%交联琼脂糖凝胶
配基	rProtein A
介质平均粒径	90μm（45-165μm）
配基密度	6 mg rProtein A/ml介质
动态载量	50 mg 人IgG/ml介质
最大流速	500 cm/h
推荐流速	<150 cm/h
最高耐压	0.3 MPa
pH稳定性	3-10（长时间）；2-11（短时间）
在线清洗稳定性	0.5 M NaOH
保存	4-8℃（20%乙醇）