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R&D Systems作为全球免疫学和细胞生物学产品的领跑者,1976年创立于美国明尼苏达州,至今已为学术界服务近40年。其母公司Bio-Techne(原Techne公司)于1983年在美国NASDAQ上市。目前,R&D Systems拥有近30,000种产品,95%以上由自己研发生产。其产品包括细胞因子、ELISA试剂盒、生长因子、趋化因子、抗体、Animal-Free™蛋白、Luminex 液相芯片、多因子检测固相芯片、流式细胞分析与细胞筛选、干细胞及细胞培养等;覆盖肿瘤、发育、糖生物、内分泌、免疫、神经学、蛋白酶、信号传导等学科研究领域;且每年有近2,000种新产品不断问世,以满足不同科研工作者的研究需要。2007年,R&D Systems China在中国成立,是R&D Systems在中国的全资子公司,全面负责在中国及东南亚地区的技术、销售及售后服务。2011年2月,R&D Systems China的子公司---R&D Systems Hong Kong Ltd.在香港注册并开始运营,负责香港及东南亚地区的营销活动。同年,R&D Systems China与芬兰Medix Biochemica在大中华地区强强合作,开始进军IVD原料供应市场。2011年4月,R&D Systems母公司Bio-Techne,收购了Boston Biochem及Tocris两大强势品牌。Boston Biochem是全球领先的泛素、相关修饰蛋白及通路研究产品专业的开发者和制造者,目前有超过800种的泛素相关产品。Tocris总部位于英国,目前提供超过3000种包括GPCR配体、神经递质、离子通路和信号抑制物等在内的化学小分子和多肽等生命科学研究试剂。 2014年,全球知名抗体生产商Novus,生命科学仪器制造商Protein Sample,中国知名蛋白生产商Primegene(普欣)都陆续加入了Bio-Techne的大家族。
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包病毒好复杂,滴度低或不出毒啥情况?

人阅读 发布时间:2018-11-05 16:47

病毒作为优秀的基因传输载体,一直是科学家们研究的热点。它是利用病毒具有传递基因组进入其他细胞的特性,进行感染。病毒可用于体内(in vivo)或细胞培养(in vitro)中的基因递送,在基础研究、基因疗法或疫苗中都有极高的应用价值。

病毒载体的包装是一个复杂的过程。

在做病毒包装实验中,常常会遇到:用同样一个病毒载体系统进行病毒包装实验,为什么有人做的很好,次次成功。有人却是时常做不出来,稳定性很差,不是滴度低就是根本不出毒?

 

影响病毒包装成功的因素
 

病毒载体的选择:腺病毒 or 慢病毒?

慢病毒:可插入细胞基因组,稳定表达,持续时间长。 包装周期短(一般两个月),感染效率相对于腺病毒要低很多。不能扩增,包装所得到的病毒滴度相对较低,不大适合直接用于动物实验。

腺病毒:感染效率高,很多细胞都能达到近 99%。纯化后的腺病毒可以直接进行动物活体注射。可以在体外扩增,一次包装所得到的滴度较高。不能整合到基因组,无法稳定表达。包装腺病毒的周期会比慢病毒长(一般两个半月)。

 

病毒包装的关键点

细胞因素、载体系统(尽量使用成熟的商业化载体系统)、构建重组的质粒正确与否、质粒抽提纯化情况、包装转染控制(24、48 小时的细胞及荧光状态判断)、目的基因对病毒包装影响 (基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等)都会影响病毒的包装。

 

病毒感染效率

病毒本身的滴度,目的细胞种类以及个人操作都会影响感染效率。

 

病毒浓缩

建议病毒浓缩后再感染。

看完影响病毒包装成功的因素,你有没有感到包病毒好复杂?你有没有尝试了好久效果也不是很理想?如果你正在为此事发愁,告诉你一个好消息:现在有可直接使用的病毒颗粒,Addgene 为你免去包装的烦恼!
 

△ 图源:Addgene 官网

Addgene 提供 Ready-To-Use 病毒产品

 

Addgene 可提供 Ready-To-Use 病毒产品

 

产品优势

1. 可以免去你包装病毒的烦恼,节省你宝贵的时间,提高研究的效率;

2. 优质的病毒颗粒可以提高对难转染细胞(如:原代细胞)的转染效率,帮助你更快地得到研究结果,促进科学研究;

3. Addgene 拥有全球强大的质粒库资源,可以提供最新文献中质粒的病毒包装服务,且每个病毒服务的分发请求同时包含原始质粒的 DNA,确保你在需要时可以直接使用,免去二次订购的烦恼。
 

△ 图源:Addgene 官网

Addgene 慢病毒包装流程

 

Addgene 可提供高质量和高滴度的病毒制剂

 

所有病毒制剂均按照优化后的标准方法进行生产,在分发给客户之前,病毒制剂都会进行滴度测定并完成 Addgene 的质量控制(包括:转移质粒的确认、病毒基因组全测序、内毒素检测、纯度测定、无菌性检测、滴度测定等,具体病毒以官网说明为准)。目前,中国用户可以通过北京中原公司订购现成的病毒制剂。

 

△ 图源:Addgene 官网

包装后 AVV 病毒纯度鉴定结果


Lentivirus 慢病毒

慢病毒以纯化后的病毒颗粒形式进行分发,适用于体外使用。最低滴度会列在每个慢病毒的材料页上,并附以每批病毒的实际滴度报告。

• Pooled CRISPR Lentiviral Libraries

• Cas9 Lentivirus

• gRNA Lentivirus

• Non-CRISPR Lentivirus

更多最新产品请致电:400-8100-881,邮箱:addgene@sinozhongyuan.com 进行咨询。

 

AAV 腺相关病毒

AAV 也以纯化的病毒颗粒形式进行分发,它适合于体内或体外使用。我们提供 100µL 滴度在 2-10E12 vg/mL 纯化后的 AAV。实际效价滴度见每批次的报告。

• Chemogenetics AAV

• Retrograde AAV

• Optogenetics AAV

• Serotype Testing Control AAV

更多最新产品请致电:400-8100-881,邮箱:addgene@sinozhongyuan.com 进行咨询。

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