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UCallM PerFectTM转染试剂试用装申请
人阅读 发布时间:2014-09-05 13:14
请将《UCallM PerFectTM转染试剂试用装申请表格》问卷信息填写完整,并Email至 info@ucallm.com,表格填写完整并发送邮件即可获得试用装一份。提供试用反馈信息的申请人可同时获得精美礼品一份(每个实验室限领一份免费样品)。
产品简介
独立研发优化的Perfect细胞转染试剂,具有高效稳定转染性能,避免了市面上现有转染试剂的缺陷,实现了无明显细胞毒性、重复性好、操作简单、转染效率高。
产品特点
产品安全, 转染效率高, 适用范围广
产品用途
本产品广泛适用于各种肿瘤细胞(如Hela、293FT、U2OS等)的高效转染。
产品效果
产品使用方法
1、细胞培养
(以六孔板为例,其它培养板或培养皿参考六孔板进行操作)
在六孔板里按2~6×104个/孔接种293FT细胞:将培养好的293FT细胞消化后在显微镜下计数,均匀地吸取并在六孔板里混匀,铺盘约16 h后准备转染。
2、稀释质粒
根据实验需求,用相应的无血清细胞培养基稀释质粒制备成DNA悬液。按2 μL/ μg DNA的比例加入3μL 易转灵转染试剂于300 μL细胞培养基中,使用涡旋振荡器不间断震荡10 s,混匀后快速离心10 s,室温静置20 min。
3、质粒转染
逐滴加入到六孔板里,约12 h后换新鲜的完全培养基,培养24-48 h后收细胞。
4、后续实验
对于基因表达,再培养24~40 h后即可检测转染效果;对于RNAi通常需要培养3~5 d,并且期间需要更换培养液。如果用于筛选稳定表达细胞株,则在转染后24~40 h即可加入适当的筛选药物,例如G418等,进行稳定表达细胞株的筛选。
保存条件
4 ℃保存,保质期3年。
各种培养介质下Perfect转染DNA 详表
培养皿 类型 |
表面积 /cm2 |
细胞培养液 体积 |
DNA |
Easyfect |
96 well |
0.3 cm2 |
100 μL |
0.1 μg |
0.2 μL |
24 well |
2 cm2 |
500 μL |
0.5 μg |
1 μL |
12 well |
4 cm2 |
1 mL |
1 μg |
2 μL |
6 well |
10 cm2 |
2 mL |
2 μg |
4 μL |
60 mm |
20 cm2 |
4 mL |
4 μg |
8 μL |
100 mm |
60 cm2 |
12 mL |
12 μg |
24 μL |
注:一般质粒质量和Perfect体积比例为1:2~1:3(具体需要量应根据具体实验而定)。