单克隆抗体药物质量控制及HPLC分析技术

Q-STAT色谱柱对经神经氨酸酶作用的去涎酸的转铁蛋白的分析

   2014-08-19
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TSKgel Q-STAT 是一款高分辨率、非多孔型、尤其适合于蛋白及其异构体分析的阴离子交换色谱柱。在本数据中,介绍了TSKgel Q-STAT 色谱柱对使用神经氨酸酶作用后、去涎酸化的(desialylation)转铁蛋白的分析。

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色谱条件
色谱柱 : TSKgel Q-STAT (4.6mmI.D. x 10cm)
流动相 :
A; 20mmol/L Tris-HCl (pH8.5)
B; 20mmol/L Tris-HCl + 0.5mol/L NaCl (pH8.5)
梯度 :
0min 5% B
20min 35% B
20.01min 100% B
23min 100% B
23.01min 5% B
28min 5% B
流速 : 1.0mL/min
检测 : UV (280nm)
温度 : 25C
进样体积 : 12μL(1.7g/L)
液相色谱仪 : Agilent 1120 Compact LC (gradient auto system)
处理程序 :
神经氨酸酶购买自Sigma(N3786)。消化酶切方法参照了产品供应商的指导手册。
在100uL 的转铁蛋白溶液(2g/L;将反应缓冲液加入套装后溶解)中加入4uL 的神经氨酸酶溶液后,37 度下孵化3
个小时。

编辑: gaowei2010    来源:丁香园