G3000SWXL 系列色谱柱对PEG化鼠单抗（IgG1）的分析
治疗性蛋白的PEG 化是一种延长蛋白药物体内半衰期的策略。本数据中，介绍了通过混合N-羟基琥珀酰亚胺酯衍生物（IgG:PEG-NHS = 1:2.5 到 1:10）将PEG 导入抗体，并使用一款分子尺寸排阻、适合蛋白分析的TSKgel G3000SWXL色谱柱进行PEG化分析的应用。
色谱条件
色谱柱 : TSKgel G3000SWXL (7.8mmI.D. x 30cm), 2 columns
流动相: : 20mmol/L Phosphate + 0.3mol/L NaCl (pH7.0)
流速 : 0.25mL/min
检测 : UV (280nm)
温度 : 25C
进样体积 : 20μL
样品浓度 :0.5g/L
液相色谱仪 : Agilent 1120 Compact LC (gradient auto system)
PEG 化程序 :
PEG 化反应是在20mmol/L 磷酸盐缓冲液 + 0.3mol/L NaCl (pH7.0)溶液中、4 度下进行的。
将PEG-NHS 酯 (SUNBRIGHT ME-050CS, 分子量：5000, NOF 公司, 日本) / DMF 的摩尔比分别为2.5、5、10
的混合物加入浓度为5g/L 的抗体溶液，孵化反应17 个小时。
取上述100uL 的反应溶液，加入900uL 的20mmol/L 磷酸盐缓冲液 + 0.3mol/L NaCl (pH7.0)后进样分析测定。
