若不能立即进行流式分析时,该如何处理样本?

   2019-04-28
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如果您已经处理或分选了目标细胞,可是忽然意识到不能马上通过流式检测分选后的细胞纯度,我们推荐采取以下措施: 

将未染色的细胞储存在 2~8 °C 至第二天上午。有些类型的细胞,其细胞活率可能会下降,但仍可进行流式细胞分析。若要提高细胞活率,可用推荐的缓冲液(如产品号 07905、20144、20104 或 20164)重悬细胞,这些缓冲液中所含的蛋白质有助于更有效地保持细胞活率。

根据实验的最终目的,可以将细胞在分析前先进行固定。在细胞纯化后,如果没有计划进行下游实验(如体外培养),可尝试将细胞固定,这样可以延迟进行流式细胞分析。将细胞在 4% 甲醛固定 30 分钟,用推荐的缓冲液洗和重悬细胞,然后将细胞储存于 2~8 °C。不推荐将样本长时间储存于 4% 甲醛溶液中。注意:一定要确认用来进行分析的抗体是否仍能与甲醛固定的细胞相结合。或者更好的办法是先将细胞染色,然后固定细胞,避光储存于 2~8 °C 直到分析。

如果要长期储存,可冻存一部分细胞以供日后分析。虽然 DMSO 是最常用的一种细胞冻存保护剂,但对于一些特殊类型的细胞,使用 mFreSR™(产品号 #05854)或 CryoStor® CS10(产品号 #07930)冷冻保存液可有助于保持细胞的活性。

编辑: z翟某某    来源:丁香园

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