真正一站式 CRISPR/Cas9 服务

CRISPR/Cas9 系统

基因组编辑是指早期遗传工程技术的生物技术的新兴分支。 通过使用这些生物技术，研究人员能够靶向特定的 DNA 序列诱导双链断裂，利用重组来产生宿主的合成遗传基因组。

CRISPR 序列及其 Cas（CRISPR 相关）基因编码适应性免疫系统，保护细菌和古细菌免受病毒（噬菌体）和质粒感染。RNA 指导的 DNA 内切核酸酶 Cas9 与双重 RNA 指导（CRISPR RNA [crRNA]）和反式激活 RNA [tracrRNA] 或合成单指导 RNA（sgRNA）缔合，并切割双链 DNA 指导 RNA 互补的序列。双链断裂发生在 PAM 位点上游 3bp 处，允许通过两个 DNA 修复途径进行靶向序列修饰：引入移码插入和缺失突变的非同源末端连接（NHEJ），导致功能丧失等位基因和同源定向修复（HDR），用于在靶基因序列处精确插入点突变或期望序列的片段。目前，CRISPR-Cas9 系统已应用于多种模式生物，包括人，小鼠，大鼠，斑马鱼，线虫，植物和细菌。

CRISPR/Cas9 技术优势

▶ 简单快速设计靶点
▶ Knock-out 和 knock-in 可以建立细胞系
▶ RNA 指导的基因组 DNA 特异性识别不需要考虑 DNA 甲基化
▶ CRISPR/Cas9 慢病毒系统可以感染分裂和非分裂细胞
▶ 靶点操作高效灵活. 多个基因可以同时编辑，基因的修饰可以是遗传的
▶ CRISPR 能应用于多种种属细胞
▶ CRISPR 与 ZFN 和 TALEN 相比具有相同或高效的基因编辑

一站式 CRISPR/Cas9 服务

CRISPR/Cas9：基因敲除细胞系构建服务
• gRNA 设计、合成及构建
• 病毒制备（针对慢病毒载体）
• 转染
• 单克隆制备及细胞建库
• 鉴定（可选）

CRISPR/Cas9：基因敲入细胞系构建服务
• gRNA 设计、合成及构建
• 转染
• 单克隆制备及细胞建库
• 鉴定（可选）

gRNA 质粒构建服务
• gRNA 设计、合成及构建
• 载体构建

一站式 CRISPR/Cas9 基因组编辑服务流程图

编辑： z翟某某    来源：丁香园