实时定量 PCR 分析服务

   2018-09-02
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实时定量聚合酶链反应 (Quantitative Real-time PCR,qPCR) 是一种分子生物学技术,用于放大和同时检测或量化靶向 DNA 分子。程序遵循 PCR 的一般原则。在 PCR 反应过程中,随着循环次数的增加,PCR 产物的积累导致荧光信号的增强。因此,通过监测荧光强度,在" 实时" 中检测到 PCR 反应的进展。

科学研究中较为常用的是 SYBR Green qPCR 和 TaqMan 探针 qPCR。

实时定量 PCR 服务内容-定性和定量的基因表达分析

1. 定性分析:检测病毒; 检测转基因; 确定品种; 突变基因分型2. 相对定量分析:参考基因和靶基因表达分析
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图 1. 用 SYBR Green qPCR 法分析转入人 IL6 基因的小鼠图 2. 样本中内参基因和靶基因的表达分析


3. 绝对定量分析:DNA(RNA) 的绝对定量分析; 转基因拷贝数测定; 病毒和病原量化4. 单核苷酸多态性分析:人类疾病分析; 个性化医疗; 人力资源管理分析
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图 1. 用 SYBR Green qPCR 法分析转入人 IL6 基因的小鼠图 2. 样本中内参基因和靶基因的表达分析

实时定量 PCR 分析服务平台:SYBR Green 和 Taqman 探针 qPCR

定量 real-time-PCR(qPCR) 如 TaqMan 和 SYBR Green qPCR 检测被广泛用于基因表达分析,两种方法的特点如下:


SYBR GreenTaqman 探针
优点• 操作简单
• 价格较低
• 更适合于相对 qPCR
• 更强的特异性
• 可进行多重 qPCR
• 更适合于绝对 qPCR
缺点• 精度略低
• 特异性低于 Taqman 探针法
• 无法进行多重 qPCR
• 价格更高
• 操作复杂

实时定量 PCR 分析服务平台优势

▶ Sino biological 为您提供 SYBR Green 染料法和 TaqMan 探针法,根据您的科研需求进行基因表达分析。通过实时定量 PCR 技术可以完成定量分析、相对定量分析或绝对定量分析
▶ Sino biological 大约有 1 万个基因质粒,具有高质量和经过验证的引物对,提高了检测效率
▶ Sino biological 还拥有一批经验丰富的技术人员,他们设计 qPCR 检测方案,并提供实验服务

实时定量 PCR 分析服务说明

服务内容周期交付内容
SYBR Green dye 法1-2 周• 分析报告
• 剩余引物
• 引物设计与合成
• qPCR 检测
• 数据分析
TaqMan 探针法3-5 周• 分析报告
• 剩余引物及探针
• 引物设计、合成与优化
• 探针设计与合成
• qPCR 检测
• 数据分析

在此项实时定量 PCR 分析服务中,客户需要提供:

目的基因名称、NCBI 编号及合格的 DNA/cDNA 待测样品

实时定量 PCR 分析服务成功案例

案例 1:用 SYBR Green qPCR 方法检测人体组织中 cDNA 的 45 个基因的检测结果。
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图 1. 以人组织 cDNA 为模板,45 个基因的扩增曲线图 2. 以人组织 cDNA 为模板,45 个基因的溶解曲线


案例 2:一对基因引物的质检报告 (包括标准曲线)。
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图 3. SDHA 标准样品的扩增曲线图 4. SDHA 的标准曲线和扩增效率


案例 3:下面实验采用 7 种人癌细胞的 cDNA 作为模板,联合 qEASY qPCR 引物进行了 SYBR Green 定量检测。由表可以分析得到,GAPDH 的表达水平是最高的,SDHA 的表达水平是最稳定的。


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编辑: dxy_8hxjask7    来源:丁香园

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北京义翘神州科技股份有限公司(Sino Biological Inc. 简称:义翘神州)是一家从事生物试剂研发、生产、销售并提供技术服务的生物科技公司,主要业务包括重组蛋白、抗体、基因和培养基等产品,以及重组蛋白、抗体的开发和生物分析检测等服务,为全球的药品研发企业和生命科学研究机构提供高质量的生物试剂产品和高水平的技术服务。