细胞转染方法比较

文章引用来源：德泰生物-资料专区-细胞转染方法比较

摘要：对哺乳动物细胞转染表达蛋白来说，选择合适的转染方法和转染试剂对转染的成功率起到决定性作用。本文主要列举了瞬时转染和稳定转染的一些方法、原理及适用性，并列举脂质体细胞转染的步骤、注意事项。

细胞转染，是指将外源基因导入细胞内的一种技术。根据哺乳动物细胞蛋白表达流程，细胞培养完成后需进行细胞转染，根据不同的实验目的选择不同的转染方法。目前，常用的细胞转染方法主要分为三类途径：物理介导（电穿孔法，基因枪法、显微注射法）、化学介导（脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物介导法）、生物介导（病毒介导转染、原生质体转染）。

理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。目前实验室常用的转染方法有脂质体转染，阳离子聚合物转染和病毒转染，不同的转染方法各有利弊，针对细胞的习性和不同的实验目的选择相对合适的转染方法。下面列举了一些常用转染方法的原理，优缺点和适用性:

▊ 细胞转染方法比较

▊ 脂质体转染步骤

1. 细胞培养：细胞铺板，加入一定量的细胞培养液，37 ℃ 二氧化碳培养箱中培养，待细胞密度生长至 80～90% 时，准备转染；

2. 在 EP 管中，加入无血清稀释的转染试剂，室温放置 5 min；

3. 在 EP 管中，加入无血清培养基稀释的 DNA，室温放置；

4. 5 min，并将二三步得到的两物质混合得到 C 液，轻轻混匀，室温下放置 15～30 min；

5. 用无血清培养基将细胞洗涤两次，在细胞中加入适量的无血清培养基；

6. 将混合得到的 C 液缓缓加入到细胞中，摇匀，在 37 ℃ 的二氧化碳培养箱中培养 6～24 小时；

7. 细胞培养 6～24 小时后，吸去无血清转染液，加入正常培养液继续培养。

▊ 注意事项

1. 转染是不能使用含有血清的培养液，血清对转染效率影响很大；

2. 转染前铺板时用无双抗培养基，抗性的增加会影响转染效率；

3. 铺板 24 小时内进行转染；

4. 整个操作过程轻柔，避免剧烈震荡。

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编辑： z翟某某    来源：丁香园