内参蛋白抗体介绍 III
我们知道,内参蛋白是指由管家基因(house keeping gene)编码表达的一类蛋白,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在实验中检测蛋白的表达水平变化时常用它们来做参照物。
这些内参蛋白常应用于 Western Blot 中,Western Blot 不仅能证明样品中是否含有某种蛋白,还能比较不同条件、不同组织和细胞中目的蛋白的相对含量,从而衡量蛋白的表达水平。内参蛋白作为一种参照物,在其中的作用为确定样本使用量的一致性,以及校正实验过程中可能出现的操作误差,从而进一步保证实验结果的准确性。那么对于不同的蛋白,内参蛋白该如何选择呢?
前面两节已经介绍了几种常见内参蛋白的选择和应用,这一节我们将系统介绍不同内参蛋白的选择及云克隆公司现有内参蛋白抗体。
对于内参蛋白的选择首先是考虑分子量。一般情况下,内参蛋白和检测的目的蛋白最好相差在 5kDa 以上。如分子量为 45kDa 的检测蛋白,我们可以选择 Tubulin Beta(54kDa),Lamin B1(66kDa)等,而不选择 ACTa2(42kDa)或者 beta-actin(45kDa)。
其次对于不同的组织,应选择不同的内参。如肌动蛋白是一种细胞骨架蛋白,有六种不同的亚型,包括: alpha-skeletal muscle actin、alpha-cardiac muscle actin、alpha-smooth muscle actin、gamma-smooth muscle actin、beta-actin (β-non-muscle) 和 gamma-non-muscle actin。其中常用作 Western Blot 内参的 beta-actin 在肌肉和脂肪组织中分布较少,那么若样本是心肌或脂肪组织来源的,就可以考虑分别用 alpha-cardiac muscle actin (ACTC1) 和 GAPDH 作为内参蛋白。
最后,提取蛋白的部位不同,选择的内参蛋白也不同。比如有时胞质、胞核分开提取而不提取总蛋白时,就要选择相应部位表达的内参蛋白。如 PCNA 在细胞核中高效稳定表达,理论上在细胞质不表达,那么对于胞质提取的蛋白,就不能选用 PCNA 作为内参蛋白,而应该选择细胞质中表达的 Tublin Beta、Actin Beta 等作为内参蛋白。
云克隆针对蛋白表达的不同细胞部位,不同组织,以及不同的分子量,推出一系列的内参抗体,满足使用者的不同需求。见表 1。
表 1. 各种内参蛋白抗体
货号 1 | 货号 2 | 目标蛋白 | 目标蛋白的亚细胞定位 | 目标蛋白的分子量 | 目标蛋白的组织表达部位 |
CAB932 Hu22 | CAB932 Hu01 | 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 (GAPDH) | 胞质,核,膜 | 36kDa | 胰腺,乳腺,胃等 |
CAB357 Hu22 | CAB357 Hu01 | 细胞外信号调节激酶 1(ERK1) | 胞质,核 | 43kDa | 脑,小肠,食道等 |
CAA930 Hu22 | CAA930 Hu01 | 细胞外信号调节激酶 2(ERK2) | 胞质,核 | 41kDa | 肾,乳腺,睾丸等 |
CAA285 Hu22 | CAA285 Hu01 | 组蛋白 H3(Histone H3) | 核 | 17kDa | 肝,肾,肺,睾丸,胃等 |
CAA591 Hu22 | CAA591 Hu01 | 抗增殖细胞核抗原 (PCNA) | 核 | 35kDa | 睾丸,小肠,甲状腺等 |
CAF548 Hu22 | CAF548 Hu01 | 核纤层蛋白 B1(LMNB1) | 核 | 66kDa | 脑,肝等 |
CAF550 Hu22 | CAF550 Hu01 | 核纤层蛋白 A/C(LMNA) | 核 | 74kDa | 平滑肌 |
CAB342 Hu22 | CAB342 Hu01 | 平滑肌肌动蛋白α2(ACTa2) | 胞质 | 42kDa | 平滑肌,乳腺等 |
CAB341 Hu22 | CAB341 Hu01 | 心肌肌动蛋白α1(ACTC1) | 胞质 | 42kDa | 肌肉 |
CAB340 Hu22 | CAB340 Hu01 | 肌动蛋白β(ACTb) | 胞质 | 45kDa | 阑尾,脾扁桃体,胃,乳腺等 |
CAB870 Hu22 | CAB870 Hu01 | 微管蛋白β(TUBb) | 胞质 | 54kDa | 脑,睾丸,皮肤,结肠等 |
CAB081 Hu22 | CAB081 Hu01 | 70kDa 热休克蛋白 1A(HSPA1A) | 胞质 | 70kDa | 食道,甲状腺等 |
CAB021 Hu22 | CAB021 Hu01 | 连环蛋白β1(CTNNb1) | 胞质 | 85kDa | 结肠,皮层神经元等 |
CAB839 Hu22 | CAB839 Hu01 | 纽蛋白 (VCL) | 胞质 | 124kDa | 肌肉 |
CAG901 Hu22 | CAG901 Hu01 | 电压依赖性阴离子通道蛋白 1(VDAC1) | 线粒体外膜 | 31kDa | 肺,肝,睾丸,胎盘等 |
CAA280 Hu22 | CAA280 Hu01 | 钙联蛋白 (CNX) | 内质网 | 90kDa | 脑,胃,肾等 |
CAB171 Hu22 | CAB171 Hu01 | 转铁蛋白受体 (TFR) | 细胞膜 | 84kDa | 肝 |
CAG369 Hu22 | CAG369 Hu01 | 钠/钾离子转运 ATP 酶α1 肽 (ATP1a1) | 细胞膜 | 100kDa | 甲状腺,胰腺,前列腺等 |
CAC060 Hu22 | CAC060 Hu01 | 血小板衍生生长因子受体α(PDGFRa) | 细胞膜 | 123kDa | 血小板,脑,心 |
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