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电泳迁移率变动分析(EMSA)实验服务

   2017-10-23
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关联信息

凝胶迁移实验又称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验(EMSA,electrophoretic mobility shift assay),是目前研究核酸与蛋白质相互作用的一种重要实验手段,常用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验。该实验利用核酸与蛋白结合后,在非变性聚丙烯酰氨凝胶中电泳的迁移速率会明显降低的原理,通过设计特异性和非特异性的探针,通过孵育与目标蛋白结合,形成探针-蛋白复合体,由于分子量变大,在聚丙烯酰氨凝胶中的电泳迁移速率下降,相比于未结合的探针会出现滞后效应,再通过探针上特殊的标记物性质,通过转膜、显色或曝光,探针-蛋白复合体所在的位置便能形成条带,从而证明核酸与蛋白的相互作用。目前随着实验技术的改进,能够定性和定量的完成实验。

EMSA 的实验流程和周期

实验流程周期特点
1、样品的制备议定1、可提供原核表达、酵母表达、病毒-昆虫细胞表达以及哺乳动物细胞表达等多种重组蛋白表达方式;
2、可提供天然样本目的蛋白富集和纯化服务;
3、可提供专用于胞浆和核蛋白的细胞裂解液,作用条件温和,裂解效率高,蛋白损伤小。
2、探针的合成和制备1-2 周1、可提供人工合成探针;
2、探针标记:可提供 DIG、Biotin、Cy5 等多种非同位素标记;
3、可提供 Super-Shift EMSA、双荧光 EMSA 等多种基于 EMSA 技术的实验服务。
3、探针与样品孵育
4、6.5% 非变性聚丙烯酰胺凝胶制备以及电泳
5、转膜
6、检测

备注:
1、所有的实验项目需遵守相关法律条款;
2、所有样本都必须不具有传染性;
3、客户可以根据自己的要求,定制个性化的实验方案。

编辑: dxy_8hxjask7    来源:丁香园

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