TIL 细胞治疗
1986 年 Rosenberg 等从小鼠肿瘤中分离出浸润淋巴细胞，将它在体外用白细胞介素 II（IL-2）扩增到一定数量后，重新输回到长瘤的小鼠后，能有效地控制肝、肺转移灶的生长，甚至可使有些小鼠的转移灶和原发灶的肿瘤完全消退。这种淋巴细胞称为肿瘤浸润淋巴细胞（TIL），它是一种新型的抗肿瘤效应细胞，具有高效、特异、副作用小等优点。经测试 TIL 细胞的抗肿瘤效果是 LAK 的 50～100 倍，如把 TIL 细胞回输到体内血液及肿瘤中可以存留达二月之久，因此它有着巨大的潜在治疗价值。TIL 已应用于临床，主要治疗皮肤、肾、肺、头颈部、肝、卵巢部位的原发或继发肿瘤。Rosenberg 对 20 例恶性黑色素瘤患者先使用 CTX 化疗，然后用患者自体 TIL 和 IL-2 治疗，结果有 60 例的病人获明显的疗效，发生在肺、肝、肾、皮肤和皮下部位的癌肿均可缩小，并维持达 2～13 个月。
TIL 是肿瘤细胞免疫治疗中的重要组成部分。第一代的 TIL，仅仅只有分离，扩增，回输 3 个阶段，无法从复杂的 TIL 细胞群中获得肿瘤特异性的 T 淋巴细胞。以 SteveRosenberg 教授为代表人物的第二代 TIL，包括了分离，筛选，扩增，回输 4 个阶段，筛选出肿瘤特异性 TIL 再进行扩增，大大提高了 TIL 治疗肿瘤疾病的有效性。但是由于 TIL 制备技术复杂，国内目前医院提供的都还只是第一代的 TIL。
肿瘤特异性 TIL 制备的全过程
第一步，我们得到病人的肿瘤组织块，其中混杂着体积较大的肿瘤细胞（浅蓝色）以及体积小而圆的 T 淋巴细胞（红色，绿色，深蓝色）；第二步，将不同种类的 T 淋巴细胞在细胞板上克隆化，并加入高浓度的 IL-2 来选择培养；第三步，在 IL-2 的刺激下不同种类的 T 淋巴细胞都得到了克隆扩增，形成了细胞群；第四步，用病人的肿瘤细胞和扩增后的 T 淋巴细胞反应，凡是能够发生杀瘤效应的 T 淋巴细胞群作为阳性 TIL 群留下（红色），其余的丢弃（绿色，深蓝色）；第五步，用负载了肿瘤特异性抗原的树突状细胞（DC）进一步扩增培养肿瘤特异性的 TIL；最后，回输给预先做了清髓的肿瘤病人。
TIL 治疗的局限性
正是由于 TIL 杀灭肿瘤的特异性和高效性，才在临床应用上获得了很好的客观有效率。那么，作为肿瘤细胞免疫疗法，TIL 治疗有哪些局限性呢？第一，TIL 制备技术复杂，通常需要筛选上百个甚至几百个 T 淋巴细胞克隆才能得到肿瘤特异性的 TIL；第二，TIL 在 T 淋巴细胞分类中属于效应 T 细胞（effector T cell）， 虽然杀瘤功能强大但是寿命短，不具备记忆能力（图 3）。第三，局限于新鲜且无菌保存的肿瘤组织样本，对于那些无法提供此类样本的病人，无法提供 TIL 治疗；第四，部分肿瘤病人由于 TIL 数量过少或者没有，无法从肿瘤组织样本中分离得到 TIL，而这类病人往往预后更差。
解决 TIL 治疗局限性的对策
为了解决第一个局限性，2014 年 Steve Rosenberg 教授在 JCI 上发表文章，指出 PD1 阳性的 CD8+TIL 与 PD1 阴性的 CD8+TIL 相比，更容易分离得到肿瘤特异性的 TIL。针对第二个局限性，Steve Rosenberg 教授从 TIL 中得到的肿瘤特异性 T 淋巴细胞中进一步获得其 T 淋巴细胞受体（TCR）的遗传信息，通过基因修饰的手段转化病人的外周血中 T 淋巴细胞，再去治疗病人，从而也解决了第三和第四个局限性。
R&D Systems 拥有 TIL 细胞治疗所需的整套解决方案，包括 T 细胞分离纯化，T, DC 细胞扩增，鉴定及评估。
1．T 细胞分离纯化
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