DNA pull down 概述
DNA pull down 概述
DNA pull down是用于分析蛋白质与DNA互作的一种分析技术。一般来说，该实验首先，需要针对待研究目的基因的调控区域设计并制备特异性探针（以脱硫生物素标记为主流）；同时，制备细胞核提取物；将探针和核提取物共同孵育，DNA结合蛋白就会和靶向序列特异性结合；然后，通过亲和素磁珠纯化蛋白质DNA复合物；最后针对获得的蛋白，使用western blot验证或者质谱方式鉴定蛋白质类型。
优点：
① 富集分析低丰度蛋白；
② 探针制备简便，周期短；
③ 获得特异性蛋白与下游蛋白质检测技术兼容；
缺点：
① 长连探针往往存在非特异结合现象；
② 反应条件要求无核酸酶；
③ 体外实验，相对体内实验存在一定弊端；
