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蛋白、抗体产品常见问题解答

   2015-03-16
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蛋白

问:冻干粉形式的蛋白或抗体产品如何溶解?

答:1)由于冻干物质可能粘在瓶帽上,在开瓶前需轻轻敲击或短暂离心瓶子。
2)为了最佳效果,请用放至室温的缓冲液作为溶剂。 
3)加缓冲液后,盖好瓶塞,轻轻用手翻转瓶子或把瓶子放在一个缓慢摇摆的摇床上。这样做来保证缓冲液能够接触到瓶子的整个内壁。请不要用涡旋器或用枪头抽打。 
4)让瓶子在室温放置至少10 - 15分钟,然后可以进行分装或使用。

 

问:为什么在瓶装的冻干粉蛋白或抗体中,有的时候看得见粉末,有的时候看不见任何东西?这会影响我的实验吗?

答:在经过冻干工艺处理前,瓶装的液体蛋白或抗体不仅含有蛋白或抗体等活性成分,同时也含有盐类缓冲液等非活性成分。在经过冻干工艺处理后,微量的冻干粉状态的蛋白或抗体会贴在试管底部,一般用肉眼看不见。但盐类缓冲液经过冻干工艺处理后,有的时候会结晶,从而用肉眼能看见“粉末”。看得见的粉末并非蛋白或抗体等活性成分本身,即使同一个批次生产出来的冻干粉状态的蛋白或抗体也会出现一瓶看得见盐类结晶,一瓶看不见盐类结晶的现象。对于这种冻干粉工艺中的现象,并不会影响到用户实验,用户可以放心按照说明书中的要求稀释并使用。

 

抗体

问:目录中抗体的名称有AB, AF, BAF, MAB之分,它们有何不同?

答:带有AB的抗体是用G蛋白纯化的,带有IgG成分;带有AF的抗体经G蛋白纯化后又经抗原亲和层析纯化。所以,AF抗体为抗原特异性的IgG,而AB抗体含有与目标分析物非特异性的IgG。BAF是生物素化的AF抗体;MAB是单克隆抗体。

 

问:IgG的分子量是多少?

答:IgG的分子量是150kDa。它由两条50kDa的重链和两条25kDa的轻链组成。

 

问:某一多克隆抗体所识别的抗原表位是什么?

答:多克隆抗体有多个抗原表位识别位点。抗体是针对整个免疫原(列在数据表中)的。

 

问:什么是Trehalose?它为什么在这个抗体上?

答:Trehalose是一种非还原糖(分子量为342.1), 它在梅拉德式(Maillard)反应中与氨基酸和蛋白都不作用。它存在于许多植物和动物中。有报道称Trehalose是稳定蛋白抗御冰冻的最有效抗冻剂,它使得蛋白抵御水分的能力增加,从而使产品在重新溶解时不容易产生沉淀物。

 

问:采用Trehalose稳定蛋白的原因是什么?

答:Trehalose主要用于在冰冻和脱水过程中保护蛋白。它是非还原糖,在干粉化时呈非结晶状。

 

编辑: tong206    来源:R&D Systems

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