迁移及浸润实验步骤对比
RTCA技术细胞迁移及浸润实验步骤：
1、取出CIM Plate检测板，上室包被一定浓度的matrigel，CO2培养箱中放置约4小时。（细胞浸润实验所需，迁移实验无此步骤）
2、下室加入含血清或其它趋化因子的培养基，以加入无血清的培养基为对照。上下室装配后，上室中加入无血清培养基并在CO2培养箱中平衡1小时。
3、将CIM Plate检测板放入检测台上（检测台已预先放入CO2培养箱中），测定背景阻抗值。
4、将一定浓度梯度的细胞接种到CIM Plate检测板的上室里，室温放置半小时。
5、将CIM Plate检测板放入检测台上，即可获得细胞迁移或浸润的实时动力学曲线。
RTCA实时无标记技术细胞迁移及浸润实验检测流程：
特点：
1、实验操作简单，步骤少，人为误差小。
2、采用无标记方法，不存在标记效率问题，并且对细胞无损伤，细胞在最接近生理状态下进行检测，结果准确度高。
3、实验结果客观，重复性好。
4、实验数据自动获取，并可轻松获得两个不同时间点的IC50或EC50。
5、可一次检测多个细胞接种浓度，时间耗费少，费用低。
6、完整细胞效应图谱，提供大量、重要的动态反应信息。
Transwell细胞迁移及浸润（侵袭）实验步骤：
1、Transwell小室制备（细胞浸润实验所需，迁移实验无此步骤）
（1）包被基底膜
（2）水化基底膜
2、制备细胞悬液，具体细胞密度需要通过多次实验自己摸索。
3、细胞接种到transwell小室中，含趋化因子的培养基加入细胞培养板中。
4、细胞培养12-48小时（主要依癌细胞迁移及侵袭能力而定）。
5、结果统计：
（1）直接计数法：
A．用棉签擦去基质胶和上室内的细胞
B．染色：常用染色方法有结晶紫染色、台盼兰染色、Giemsa染色、苏木精染色、伊红染色。
C．细胞计数：选取5-10个视野计数。
（2）间接计数法：
A．用棉签擦去基质胶和上室内的细胞
B．细胞培养板中加入含0.5mg/ml MTT的培养基，将小室置于其中，膜浸没在培养基中，37℃ 4小时后取出。
C． 加入DMSO，将小室置于其中，使膜浸没在DMSO中，振荡10分钟，使甲臜充分溶解。取出小室，酶标仪上测OD值。