抗体与蛋白研发专家

实验

常见技术问题2018-10-15

抗体的保存温度是不是越低越好？当抗体杂带比目的带还要粗很多，如何确定目的条带？ABclonal 抗体中会不会添加防腐剂，对抗体的使用效果产生影响？

WB 实验技术指南2018-10-15

WB 即通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色，分析着色的位置和着色深度获得表达情况的信息。

分子克隆操作程序2018-10-15

酶切产物用 DNA 产物回收试剂盒回收，具体操作按试剂盒说明书进行，将电泳图贴到记录本中。

表达质粒转换的操作程序2018-10-15

感受态取出后，剩下的应立即放回冰箱； 注意水浴锅温度稳定和热击时间。

成品抗体检测程序2018-10-15

对于贴壁细胞，到掉培养液，PBS 洗 2 次；对于悬浮细胞，先 1000 转/min 离心 5 分钟收集细胞，用 PBS 轻轻吹打重悬，再次离心。

蛋白表达-破菌操作程序2018-10-15

诱导时菌体浓度，OD 值范围 0.5-0.6；根据第一次破菌之后沉淀多少决定是否需要第二次破菌。

蛋白纯化流程2018-10-15

GST 融合蛋白与还原型谷胱甘肽的结合比较缓慢，需要控制上样和洗脱时流速（上样不高于 3mL/min，洗脱不高于 1.5mL/min），让其有足够的吸附和分离时间，以便达到最大的结合载量。蛋白的性质、pH、温度等也会影响蛋白的结合载量。

抗体纯化以及蛋白浓度测定程序2018-10-15

碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原，产生深蓝色。

融合蛋白纯化的程序2018-10-15

纯化过程中琼脂糖保持在液体环境中，切忌抽干；上样及洗脱流速不可过快。

小规模测试表达程序2018-10-15

当有乳糖存在时，lac 操纵子（元）即可被诱导。在这个操纵子（元）体系中，真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖进入细胞，经 b－半乳糖苷酶催化，转变为半乳糖。

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武汉爱博泰克生物科技有限公司依托 ABclonal 美国波士顿抗体与蛋白研发中心、中国光谷生物城 (武汉) 抗体生产基地以及上海张江分子酶研发中心，凝聚了十余位全球知名分子和免疫学方面博士，致力于抗体与蛋白技术的研究。详情 >

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