流式检测中抗体的荧光强度

2017-08-28

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流式细胞仪检测到的荧光强度是没有单位的，由于光电倍增管电压的高低能够直接影响检测值，所以我们把检测值跟空白的比值称之为「相对荧光强度」。荧光抗体做细胞表型分析，FL1、FL2、FL3 等一般都用的是对数（LOG) 模式放大，那我们是如何观察和理解数据分析的呢？

根据研究目的和表达差异来确定，如果样本间表达量相差甚大，那么通过百分比 Gate% 或者 Total% 就能清晰表现出来，当然了，平均荧光强度，即 Mean 值也更能表现出来。但是如果样本间表达的百分比差异不明显，仅在荧光强度上有明显差异，那么采用平均荧光强度这一组数据便可清晰表现出来。

在我们分析数据过程中，通常都会看到 Mean/GeoMean/Median，这三个均是表示荧光强度，如下图所示，那么这三者之间又有什么差别呢？

荧光强度.png

如果数据分析在线性（Lin）模式呈正态分布的，那么建议使用平均荧光强度，即 Mean 值，所有细胞的荧光强度相加，再除以 N，N=细胞数。如果数据分析在对数（Log）模式下呈正态分布，那么建议使用几何平均数，即 GeoMean，所有细胞的荧光强度相乘，再进行 N 次开方，N＝细胞数。而另外一个 Median，则是指中位数，是对所有细胞的荧光强度进行排序，位于 50％处的荧光强度值。

题图来源：shutterstock 正版图库

编辑： weicf 来源：丁香园

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