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缺血性急性肾功能衰竭动物模型—
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缺血性急性肾功能衰竭动物模型——技术服务
北京信生元生物医学科技有限公司
只
临床上缺血性急性肾功能衰竭(ARF)是以肾功能在数小时到几天之内急剧变化,导致肾脏排出氮质代谢废物的能力,以及维持体内水和电解质稳定功能丧失为特征的急性肾脏病变。肾脏是机体内血液供应充分的器官,对缺血反应极其敏感,肾脏缺血1d后即可发生急性肾小管坏死和肾功能衰竭。而短期缺血后再灌注,肾脏就可通过小管上皮细胞的迅速增生而修复受损的肾小管,肾功能也随之恢复。本模型采用外科手术的方法使模型动物肾脏的供血受阻,引起肾功能失去作用,导致肾脏实质细胞缺氧缺血,最终造成肾小管上皮细胞损伤,并影响机体的离子交换、重吸收及排泄功能,出现急性肾功能衰竭临床表现。用本方法建立的ARF模型可用于探讨ARF发病机制及氧自由基清除剂对ARF防治作用方面的研究。
肾缺血/再灌注后能导致模型大鼠肾组织中SOD含量下降,MDA含量显著升高,且二者含量随再灌流时间的持续,呈更明显的渐进性变化。采用本方法的造模机制是基于机体肾缺血时线粒体功能发生障碍,ATP不能利用,依次降解产生大量次黄嘌呤。缺氧条件下,次黄嘌呤不能在体内代谢为嘌呤而发生大量堆积;同时缺血时肾黄嘌呤脱脱氢酶会迅速转变为黄嘌呤氧化酶,当血液再灌流时,有氧情况下,黄嘌呤氧化酶可将堆积的次黄嘌呤代谢为嘌呤,再进一步生成尿酸。在此过程中,机体内会产生大量超氧阴离子,并再进一步生成羟自由基和H2O2,这些自由基可通过膜的脂质过氧化而肾组织造成损害,即对生物膜(如细胞膜)中含有的大量不饱和脂肪酸进行降解,产生有细胞毒性的脂质过氧化物,造成细胞坏死和脏器功能减退。脂质过氧化物最终会裂解成包括MDA在内的许多终末产物。
1. 肾功能衰竭的相关机制研究;2. 肾功能衰竭相关药物筛选和疗效评价;3. 比较医学研究。
大鼠
①体重为200-300g的雄性大鼠,经腹腔按30mg/kg体重的剂量注射 麻醉,麻醉后动物仰卧固定于手术板上,腹部手术区常规消毒与去毛,作腹部正中切口,行右肾切除术,钝性分离左肾包膜,左侧肾动脉用无损伤血管夹阻断60min,松夹恢复肾灌注,观察再灌流前、再灌流后15min,24h肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的变化。 ②体重为200-300g的雄性大鼠,经腹腔按30mg/kg体重的剂量注射 麻醉,麻醉后动物仰卧固定于手术板上,腹部手术区常规消毒与去毛,作腹部正中切口,钝性分离双肾包膜,用无创伤动脉夹阻断双肾动脉60min后,松夹恢复肾灌流制备ARF模型。
①体重为200-300g的雄性大鼠,经腹腔按30mg/kg体重的剂量注射 麻醉,麻醉后动物仰卧固定于手术板上,腹部手术区常规消毒与去毛,作腹部正中切口,行右肾切除术,钝性分离左肾包膜,左侧肾动脉用无损伤血管夹阻断60min,松夹恢复肾灌注,观察再灌流前、再灌流后15min,24h肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的变化。
②体重为200-300g的雄性大鼠,经腹腔按30mg/kg体重的剂量注射 麻醉,麻醉后动物仰卧固定于手术板上,腹部手术区常规消毒与去毛,作腹部正中切口,钝性分离双肾包膜,用无创伤动脉夹阻断双肾动脉60min后,松夹恢复肾灌流制备ARF模型。
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