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自噬研究现状
自噬是细胞中存在的一种非常关键的“减肥”机制。在饥饿、能量缺乏等代谢应激条件下,细胞会通过自噬来获得新的能量来源和物质需求以维持细胞的基本生命活动。同时自噬还参与多种疾病的发生和发展。大量研究表明,自噬功能障碍与衰老、肿瘤、神经退行性疾病、心脑血管病、代谢糖尿病和自身免疫疾病的发生发展密不可分。由此,揭示自噬在不同疾病中的作用机制并发现靶向自噬功能障碍的药物正成为药物研发的热点领域。也正是由于自噬的重要性,自噬成为近年来年国自然中标热门词汇,也是“ 诺贝尔奖”级别的热点。
自噬简述
自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡,并与溶酶体融合形成自噬溶酶体,降解其所包裹的内容物的过程。自噬是细胞内固有的用来降解非必须或者错误折叠的细胞组分的过程,单词autophagy 来自于希腊语,auto=self phagy=phagein=to eat,吃掉自己~ 自噬过程中,待降解的组分形成双层膜结构的自噬小体,通过与溶酶体的融合,完成降解和再利用。在疾病发生的过程中,自噬一般被认为是细胞对外界环境压力的响应,在某些场合能够促进细胞存活,但在另一些场合促进细胞死亡。已有的自噬研究表明,AMPK-mTOR 通路在自噬过程中发挥重要作用,通过一系列自噬相关基因(autophagy associatedgene, ATG)家族蛋白完成自噬的过程。
无论是研究自噬与疾病的关系,还是筛选自噬相关药物亦或是研究自噬的信号通路,都离不开对自噬体的观察与检测。下表对比了目前比较主流的几种检测自噬的方法, 各有利弊。
就目前来说,采用RFP-GFP-LC3融合蛋白来示踪自噬流已成为检测自噬流的通用方法。它利用了绿色荧光蛋白对酸性环境敏感的特性,一旦自噬体与溶酶体融合成自噬溶酶体,绿色荧光在酸性环境下不发光,而红光则稳定发光,因此通过颜色变化就可以区分自噬体与自噬溶酶体。下图为 RFP-GFP-LC3融合蛋白检测自噬流原理。 吉凯自噬产品优势 1. 吉凯提供多种双荧光病毒系统:GFP-RFP-LC3双标慢病毒和GFP-RFP-LC3双标腺病毒。双标病毒融合蛋白元件包含红色荧光蛋白Stub-RFP、绿色荧光蛋白Sens-GFP 和自噬标记蛋白LC3,可监控自噬体及自噬溶酶体的形成。 2. 网上商城提供BECN1、ATG5、ATG7等自噬相关基因干扰/过表达现货慢病毒,低至2880,最快5个工作日发货。 3. 吉凯提供GFP-RFP-LC3双荧光共聚焦自噬流检测服务,提供高质量共聚焦照片,更包含自动化计数及数据分析,结果可直接用于文章发表。 吉凯自噬产品详情
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