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细胞增殖实验(MTT法)
实验服务
上海丰恒
具体报价根据实验设计和样本量而定
一、服务介绍
细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老和死亡的细胞;同时,多细胞生物可以由一个受精卵,经过细胞的分裂和分化,最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出,通过细胞分裂,可以将复制的遗传物质,平均地分配到两个子细胞中去。可见,细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。真核细胞的分裂方式有三种,即有丝分裂、无丝分裂和减数分裂。
二、实验原理
MTT是3-(4,5-dimethyl-thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide的简称。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。然后采用二甲基亚砜(DMSO)溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在570 nm波长处测定其光吸收值,反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。
三、实验流程(以贴壁细胞为例)
1、收集对数期细胞,调整浓度;
2、将细胞种植于96孔板中,待细胞贴壁后(约4-12 h)加药;
3、5% CO2,37oC孵育一定时间;
4、每孔中加入200 μL MTT溶液(配制成5 mg/ml),培养4 h;
5、吸去孔内的培养液,加入150 μL DMSO,可继续孵育4 h,使结晶物充分溶解;
6、取出96孔板,将其置于酶联免疫检测仪上,震荡15 s,然后在570 nm(630 nm校准)下测量吸光值。
7、结果统计分析
四、服务说明
五、质量承诺提供清晰的图片、可靠的检测数据和分析结果。
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