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一步法快速高效感受态细胞制备试
6个月
一步法快速高效感受态细胞制备试剂盒
大量
Biosntech
4°C
25ml
产品简介 本公司生产的一步法快速高效感受态细胞制备试剂具有省时、实用、转化效率高、不用热休克等特点。制备的感受态细胞转化效率可达108cfu/μg质粒,在-70℃下可保存一年以上转化效率不发生改变。试剂盒组成
操作步骤 1、新鲜过夜培养的细菌,1:100稀释到提前37℃预热的LB培养基中,放入摇床,37℃,225rpm培养,待OD600值达到0.3~0.4。 2、在无菌条件下,将细菌转移到一个灭菌处理过的用冰遇冷的50ml离心管中;4℃,3000g离心10分钟。 3、弃掉上清,加入1/10体积的SCC buffer,轻轻混匀。 4、分装到EP管,100ul/管,-70℃保存。注意事项 无菌操作,避免交叉污染。附:感受态细胞转化步骤 1、新鲜制备(或-70℃取出冰浴融化)的感受态细胞,加入1ul(100pg~1ng)的质粒DNA,轻轻混匀。 2、4℃孵育30分钟。 3、加入0.9ml SOC培养基,37℃,225rpm,振摇1小时。 4、10000rpm离心30秒,去掉部分上清,留取400ul重悬,涂平板,37℃倒置培养12~16小时。
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