对于转染的效率的问题,要看细胞的状态,质粒的大小,对于脂质体转染,一般会有一个最佳的推荐比例,这个实验人员也可以自己摸索,但是对于脂质体转染的效率一般40%左右吧,如果质粒小的话,可能转染效率会更高,如果想获得更高的转染效率而且质粒偏大的话,病毒是不错的选择,就是花钱多,周期长
发表于2012-10-04 19:31
对于转染的效率的问题,要看细胞的状态,质粒的大小,对于脂质体转染,一般会有一个最佳的推荐比例,这个实验人员也可以自己摸索,但是对于脂质体转染的效率一般40%左右吧,如果质粒小的话,可能转染效率会更高,如果想获得更高的转染效率而且质粒偏大的话,病毒是不错的选择,就是花钱多,周期长
发表于2012-10-04 19:31
lhs521521: 用G418筛选,筛选到7天,细胞基本上都死亡
细胞都死了,说明转染效率不高,基本上是假阳性,没有整合到染色体上,可以把转染比例适当调整一下,转染时间再延长些。还有一点,在药筛之前可以先鉴定一下转染效率,通过荧光或RT-PCR或WB检测,在确定转染效率高的比例下在进行药筛,成功可能性会大些。
发表于2010-08-29 08:57
我也做过lipo2000转六孔板,细胞死得很厉害,有可能是你细胞状态不好,但是我细胞状态很好也是大片大片的死,我想最主要的原因是lipo2000的推荐量对细胞毒性太大了
发表于2010-08-24 23:04