关键词: 肿瘤细胞侵袭试验 Tumour Invasion Assay
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二、材料
1、Matrigel 基质胶(威格拉斯生物技术(北京)有限公司),10mg/ml,5ml,分装成0.5ml/只10个EP管中;用时加入0.5ml的DMEM;Matrivgel在冰上维持液态,室温时可迅速凝结成胶。使用前应从-20℃转移至4℃待其自然溶化(如过夜放置),避免反复冻融。使用时需接触Matrivgel的试管、移液吸头等均应预冷于4℃;注意无菌操作;
2、24-transwell (Coster);
3、结晶紫染料溶液:结晶紫用甲醇配成0.5%的母液,使用浓度为0.1%,用PBS按1:4稀释后即为染色液;
4、33%醋酸;
三、实验步骤
1、溶液配制:
(1)溶DMEM 500ml;
NE---A液(1μg/μl,1mg/ml)
母液0.1ml(5mg)+ ddH2O up to 5 ml ;过滤消毒,-20℃保存。
NE-DMEM(-6M)
NE---A液(1μg/μl,1mg/ml) 20.5μl
DMEM UP TO 100 ml
过滤消毒,4℃保存
(2)NE+CGRP-DMEM(-6M,100ng)
CGRP-储存液 50 μl
(3)NE+IFN-DMEM(-6M,50ng)
IFN-γ(25ng/μl) 25 μl
(4)低血清DMEM培养基(上室)
(5)20%FBS-DMEM培养基(下室)
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你所在的学校的补助在全国是什么水平?
还记得你在读研时,所在学校的补助是多少吗~?读博的也可以说说呀。我的好少,有点想哭。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
小伙伴们,请问你们的女(男)朋友是怎么找到的?(好给后来的朋友参考啊)是交友网站,还是七大姑八大姨介绍,还是同学自然成事?春天到了,我也想拥有一段甜甜的恋爱~看看你们可怜又可爱的小师弟小师妹吧!
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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