TRIzol RNA提取方法
(一)试剂准备1.TRIzol试剂。 2.氯仿 3.异丙醇 4.75%乙醇(DEPC H2O配制) 5.DEPC H2O(二)操作步骤1. 样品处理: (1)培养细胞:收获细胞1-5×107,移入1.5ml离心管中,加入1ml Trizol,混匀,室温静置5min。 (2)组织:取50-100mg组织(新鲜或-70℃及液氮中保存的组织均可)置1.5ml离心管中,加入1 ...
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蔗糖密度梯度离心
问:我在做病毒纯化时,需先用超速离心,再用蔗糖密度梯度离心,求助高手用蔗糖密度梯度离心时的转速与超速离心时的转速有联系吗,是相等还是蔗糖密度梯度离心的转速要比超速离心的速度高?若为后者,那又若何决定蔗糖密度梯度离心时的转速?谢谢!答:1、病毒的纯化时,先用超速离心,你应该查一下资料,看在多大的转速时能够把病毒离心下来.那么你的这一步的转速应该至少不小于该转速,你这一步离心下来的沉淀中含有病毒和蛋 ...
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大豆分离蛋白的提取方法
大豆的蛋白含量较高而且营养丰富,一般含蛋白30%——50%。大豆蛋白含有8种人体必需氨基酸,且比例比较合理,只是赖氨酸相对稍高,而蛋氨酸和半胱氨酸含量较低。目前大豆蛋白已成为一种重要的蛋白资源,特别是大豆分离蛋白含蛋白质90%以上,是一种优良的食品原料。大豆分离蛋白主要由11S球蛋白(Glycinin)和7S球蛋白(β-con-glycinin)组成,大约占整个大 ...
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细胞离心
问:细胞离心时要用多少转速及转多久比较合适,不会伤到细胞?谢谢。答:消化离心一般1000转/3分钟,或800转/5分钟。答:动物细胞, 其离心速率一般为300xg (约1000rpm),5 - 10 分钟, 过高之转速,将造成细胞死亡。RPM和G是不同的概念,用G更科学;同样的离心力,转子半径不一样,RPM相差很大(与R平方成正比)。答:细胞离心一般500G作用10分钟以内不会有太大问题(根 ...
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