蛋白标签(Protein Tag) 所谓蛋白标签(Protein Tag)是指利用 DNA 体外重组技术,与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪、和纯化等。常用的标签有His、GST、Strep、MBP、Flag 和组合式的双标签。Cytiva 可为大家提供以下标签蛋白纯化的填料和多种规格的预装柱。
His 标签蛋白填料简介
His 标签蛋白填料的选择
1 科研微量分析和制备
Cytiva 经典 Ni 填料 Ni Sepharose 6 Fast Flow(FF)和Ni Sepharose High Performance(HP)适用于实验室级别目标蛋白的分析和制备。如需快速进行目标蛋白的捕获,可选择 Ni Sepharose 6 Fast Flow(FF)填料,它可帮助您节省一半的时间以提高课题研究的进度。如对蛋白纯度有较高要求,Ni Sepharose High Performance(HP)是您的不二选择,它的粒径更小,可在保证回收率的同时帮助您获得更高的蛋白纯度。
2 样品杂质成分复杂
TALON Superflow 填料螯合有 Co2+, 对His标签蛋白的选择性高于传统的 Ni填料,可获得更高纯度的目标蛋白,减少非特异性杂带的影响。并且,90 μm 大的凝胶颗粒降低了填料对样品预处理的要求,可直接使用细胞裂解液进行柱层析实验。
3 样品含有 DTT 或者 EDTA 等添加剂
Ni Sepharose excel 填料能够耐受高达 100 mM EDTA 和 10 mM DTT,特别适合使用在有添加剂和还原剂存在的样品以及真核细胞表达的分泌蛋白。此款类型填料无需去除 EDTA 即可使用含有培养基的蛋白组分进行柱层析实验,极大地简化实验流程,保护蛋白活性。同时,Ni Sepharose excel 填料支持不脱 Ni 的情况下直接进行 NaOH 清洗,防止交叉污染。