标签: 兴奋剂检测 激素
高效液相色谱-串联质谱技术(LC-MS)是采用高效液相分离技术与质谱质量分析串联技术进行样品定性定量分析的手段。可以用于(1)不挥发或者极性化合物的成分分析;(2)生物大分子(包括蛋白,多肽,多聚物等)的分析测定;(3)对含量极低到匹克级的成分也可以进行准确的定量。
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1. 取样: 称取约500 g动物肌肉、肝脏,完全切碎后,匀浆备用;取10枚鲜蛋,去壳,均质备用;取鲜牛奶500 mL,混匀备用。
2. 提取:试样5 g,置于50 mL离心管中,加入10 %碳酸钠溶液3 mL和10 mL乙酸乙酯,均质30 s,振荡10 min(4℃),6000 r/min离心10 min,将上层有机相转移至梨形瓶中。再用10 mL乙酸乙酯重复提取一次,合并上层有机相。在40℃下,旋转蒸发至干。用50 %乙腈水溶液1 mL溶解残余物,溶液冷冻30 min,16000 r/min离心5 min,取适量溶液经0.22μm滤膜过后,供LC/MS/MS法测定。
3. 进样分析
2. LC-MS接口避免进入不挥发的缓冲液,避免含磷和氯的缓冲液,含哪和钾的成分必须<1mmol/1,盐分太高会抑制离子源的信号和堵塞喷雾针及污染仪器。
3. 选择合适的电压:当DP电压(去簇电压)高时,样品在源内分解或碎裂,也会使得多电荷离子比例低,多聚体也减少。
2. 正、负离子模式的选择:一般原则为正离子适合碱性样品,可用于乙酸或甲酸对样品加以酸化,样品中含有仲氨或叔氨时可优先考虑使用正离子模式。负离子适合酸性样品,可用氨水对样品进行碱化。3.来源于《药物色谱分析》丁黎主编。
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