丁香通

The flaming of lips of tubes and flasks must ALWAYS be done whenever culture liquid is to be poured from a container (e.g., pouring plates). Flaming should be routinely done when caps are removed from tubes during transfer of cultures. The purpose of flaming is not to sterilize, but to warm the tube and create warm air convection currents up and away from the opening. This "umbrella" of warm, rising air will help to prevent the entrance of dust particles upon which contaminating bacteria reside.摘自：http://structbio.vanderbilt.edu/chazin/wisdom/labpro/sterile.html

每次从试管或者培养瓶中倾倒培养液的时候，都要使用火焰灼烧瓶或者管的盖子。当转移培养物时，也应该常规性的灼烧。灼烧的目的不是消毒，是为了加热试管以产生自瓶口处上升的热对流空气。这种热的空气“保护伞”能够防止携带有污染性质细菌的尘埃落入试管。

上面摘自一篇关于细菌培养中的无菌操作的文章，也是大家很熟悉的东西了，大肠杆菌扩增就是这么搞的。作者说在转移液体或者培养物之前要先用火焰灼烧瓶口，再打开盖子。这样瓶口就会比周围的空气温度高，空气受热形成密度较低的热气流，向上流动，也就是作者说的 “"umbrella" of warm, rising air”。向上的热气流的好处就是，能够预防空气中的尘埃飘落入试管或培养瓶，而细菌是依附在尘埃上面的。空气中微生物大多附着在灰尘粒子上，以微生物气溶胶（Microbiological aerosol）的形式存在于空气中。很显然，原文中的细菌操作并不是在一个洁净空气环境下进行的，而且与超净台内需要垂直、匀速、向下气流截然不同的是，原文需要近乎静止的空气环境，以免干扰微弱的热对流空气。虽超净台内与原文中的环境相差很大，但是使用火焰的操作是相同的。问题在于，两者的目的差别明显，超净台内是为了杀死细菌，消毒；原文是为了产生热气流，防止尘埃落入培养体系。假设原文值得相信（我感觉是有些道理的），那么相同的火焰操作，在两个截然不同的环境下，何以会有截然不同的目的呢？

我们单位对于生物安全柜内的操作是这样的:塑料制品不用酒精灯,玻璃制品开盖关盖都用酒精灯烧口.也没有发生细胞污染现象,我觉得挺科学的，供大家参考。

深有同感，酒精灯使用容易坏，我想应该能起到消毒的效果吧，但不知是不是有其他损害 。

我们现在用的是生物安全柜，用的酒精灯火苗老是朝下走，都炸了好几个了，据他们的工程师讲，安全柜里只能用酒精喷灯，这种灯的火苗是朝上的，一般不会炸裂，比较安全。就是开盖、盖盖用酒精灯烧一下，一直没有污染过。

我个人认为还是放酒精灯比较好，按照传统的做法，我们在开培养瓶和关培养瓶的时候都会过一下酒精灯，这种做法也是安全起见，因为我们在打开培养瓶之后，瓶口是湿润的，如果超净台空气中有悬浮的细菌，它首先接触的就是瓶口，还有，我们在倾去培养液的时候（我一般是直接倒掉，有的同学谨慎点会用移液管吸掉），也有可能会有贱起的液体粘到培养瓶上，过一下酒精灯会一定程度上防止这些情况的污染，在加上高温在瓶口产生的瞬时负压，会阻止空气进入培养瓶，也对防止污染有好处。所以，我认为还是放酒精灯比较好点。

即使国内的空气很脏，即使超净台不如生物安全柜干净，使用酒精灯也不会有任何作用。酒精灯的火焰在短暂的作用于物体表面时，是不可能杀灭细菌的。大家使用酒精灯只是在浪费时间，增加起火机会而已。

生物安全柜和超净台的风向是不同的，前者不需用酒精灯，后者用。

不知道大家有没有做过动态条件下的“超净工作台”、“生物安全柜”的微生物、尘埃粒子的监控？从我们以前的数据来开，其实是怎么搞都可以达到100级的，还可以了。

这里的数据是这样的：作微生物试验的时候用生物安全柜，用酒精灯，结果同步检测4小时，培养皿里面什么都没有长，可以认为没有什么的吧？无菌培养的时候，用超净工作台，用酒精灯，同步检测4小时，结果，培养基里面什么都没有长，也可以说没有什么的吧。也许您要问了，为什么我一定要用酒精灯呢？的确已经养成这样的习惯了，每次打开东东的时候，都用火焰烧烧容器口从个人理解来看，如果大家作培养的，只要用到的东西都是有保证的，应该用不用酒精灯都是可以的吧。

我也认为超净台内可以不用酒精灯，特别是工业酒精，粉尘特别多反而影响超净台内的洁净程度。 还有一个问题就是很容易爆炸，我本人做细胞工作3年左右碰到过两次。

楼上有人说进出超净台物品可能会有污染，我目前都是将进出超净台的物品能用过氧乙酸擦洗的就用过氧乙酸，不能用的就提前放入超净台用紫外先照射30min。