二十二、制备多聚赖氨酸盖玻片方法一
用超纯水配成母液浓度为1mg/ml的多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine),分装好以后-20度保存,用的时后再冻融。
方法:
1.吸取约0.25ml滴在无菌的盖玻片上过夜,使多聚赖氨酸粘附在盖玻片上。
2.第二天吸去多余的多聚赖氨酸溶液,把盖玻片依次经去离子水、Tyrode溶液和去离子水浸洗两次。
3.空气干噪并用紫外灯照射15分钟后即可使用(不要求无菌的话操作可简单一些)。
二十三、制备多聚赖氨酸盖玻片方法二
自来水浸2h,浸酸过夜,自来水冲洗干净,95%乙醇浸12h,70度烤干,高压处理,涂一层多聚赖氨酸(0.025mg/ml),室温包被4h,DD水冲洗10遍,无水乙醇冲洗,超净台风干。盖玻片易碎,处理时动作要轻,还有一次多处理一点,备用。
1.多聚赖氨酸不能高压灭菌,本身就是氨基酸,高压会破坏它的成分。
2.多聚赖氨酸可以紫外照射,包括国外的文献,都说过用之前用紫外照射。
3.做之前要先把游离的多聚赖氨酸洗去。
综观上述,有个别细节问题大家的建议好像不太统一或者我没有找到答案:
1.能否紫外照射铺好多聚赖氨酸的板子?
有战友提到:不能。
其他很多战友提到除过滤外使用紫外灭菌。
2.配好的存储液能否反复冻融?
有战友提到:“多聚赖氨酸在水溶液中易分解,所以一次不要配太多工作液。”
战友提到:不能反复冻融。
没有看到明确说反复冻融无影响的。
编辑: shinewsz 作者:lingling9