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2008-11-02
·基因组大小 基因组学 ]
一个很有趣的课件，从基因组大小谈到基因组各部分的功能、组织。
... [阅读全文 ]
2008-11-02
·发光免疫技术 基础知识 ]
发光免疫技术是将发光系统与免疫反应相结合，以检测抗原或抗体的方法。其既具有免疫反应的特异性，兼有发光反应的高敏感性，在免疫学检验中应用日趋广泛。本课件对发光免疫技术的原理、化学发光剂和标记技术、化学发光免疫分析的类型逐一进行了介绍。
... [阅读全文 ]
2008-11-02
·DNA复制 基础知识 ]
本PPT介绍DNA复制过程及其机制，是分子生物学的好教材。可供生物化学、分子生物学教师和学生教学和学习使用。
DNA Replication.ppt ... [阅读全文 ]
2008-10-01
·血球计数板细胞计数法 基础知识 ]
细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板（血球计数板）进行。即可用于分离（散）细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，也可用于对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象如何，均须制备分散的细胞悬液。
一、步骤
1、制备细胞悬液：对于悬液培养的细胞，可直接进行下面的步骤2（计数与计算过程）。如果计数对象为贴壁生长的细胞，首先需将培养物按如下步骤制备成细胞悬液。
1）、 ... [阅读全文 ]
2008-08-31
·激光共聚焦扫描显微镜在生物学上的应用 基础知识 ]
激光共聚焦显微镜适用于细胞生物学、细胞生理学、神经生物学和神经生理学等几乎所有涉及细胞研究的医学和生物研究领域。
在生物学上应用的最大特点是对活细胞进行无损伤性的实时观察分析。能对活细胞，组织进行形态和功能相结合的研究，包括细胞、组织结构的精确描绘、定位（二维和三维）和上述结构的动态变化，进行准确的定性、定量、定时和定位分布观察，细胞生物物质、离子的准确定性、定量、定时和定位分布检测，细胞离子通道 ... [阅读全文 ]
2008-08-28
·流式细胞仪技术概述 基础知识 ]
流式细胞仪技术，主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置)，光检测器把散射光定量转化成电信号，经数字转换器进行数字化后而成整数，然后进行电子存储，以后数据可以调出显示和进行分析。其优点如下：
1、具有操作简便，只 ... [阅读全文 ]
2008-08-24
·IVC和超净工作台的使用方法 基础知识 ]
【目的与要求】
了解IVC系统和超净工作台的原理结构、维护、操作程序和注意事项。
【仪器与材料】
IVC、超净工作台、一次性手套、口罩。
【步骤】
一、师讲述IVC系统和超净工作台的原理结构、维护、操作程序和注意事项。 二、学生在教师指导下进行各项基本操作。
【内容】
一、原理和结构
IVC笼盒由耐高温（至少能耐150～160℃高温以上）的透明塑料材料制成，一套笼盒由上盖、底盒、食槽、水槽、锁紧 ... [阅读全文 ]
2008-08-24
·时间分辨荧光光谱中信噪比与测量精度的提高 基础知识 ]
建立了随机噪音的经验模型，并通过计算机模拟超短寿命的荧光衰减过程，研究了利用取样法测量时间分辨荧光光谱实验中实验参数的选取对实验结果的影响。结果表明，增大“门宽”可以提高信噪比，从而实现微弱荧光信号的测量；减小“延时”可以提高时间分辨率，即提高测量精度；选取不同的“门宽”时，测量结果中各个衰减组分初始荧光强度
的比例关系会发生改变，并推导出测量值与实际值的对应关系，可以从测量结果反推出实际的比例。另外，测量了GaP样品的时间分辨荧光光谱，实验结果验证了所提出的随机噪音经验模型以及提高信噪比与测量精度的方法。并且利用该结论测量了LN Er样品微弱荧光的时间分辨荧光光谱。 [阅读全文 ]
2008-08-24
·台式动物麻醉机（图） 基础知识 ]
1、【仪器名称】：台式动物麻醉机。
2、【仪器型号】：50260。
3、【生产厂家】：美国。
4、【检测适用范围】：仅用于小型啮齿类动物麻醉。
5、【仪器使用优点、缺点】：
50260 VMC三氟氯溴乙烷气体麻醉机包括氧气和N2O气流表，流速1～1000毫升/分钟，流速自动补偿，温度自动补偿，蒸气聚集度0.5～5%。N2O与麻醉气体混合可以减小单一成份的使用计量，气流表和蒸发器装在台面上。此麻醉机 ... [阅读全文 ]
2008-08-24
·化学发光免疫分析测定EB病毒衣壳抗原IgM抗体的方法学评价 基础知识 ]
【摘要】目的 对化学发光免疫分析法(chemiluminescent immunoassay ，CLIA)测定 EB 病毒衣壳抗原的 IgM抗体( EBV2VCA IgM)进行方法学评价 ，同时将其对儿童传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis，IM)的诊断准确性与传统的 ELISA测定相比较。方法 在全自动 CLIA仪上测定88例血清标本，同时用 ELISA法测定。 ... [阅读全文 ]
2008-08-23
·核磁共振（NMR）测试技术进展及应用 基础知识 ]
摘要：
介绍了核磁共振（NMR）测试技术进展，着重介绍固体高分辨核磁共振和二维核磁共振技术的进展及它们在高分子材料领域的主要应用举例。
引言
核磁共振（Nuclear Magnetic Resonance，NMR）现象是1946年由哈佛大学的E.M.Purcell和斯坦福大学的F.Bloch所领导的两个小组，用不同的方法观察到的。他们二人由于这项重大发现，共同分享了1952年诺贝尔物理学奖。
最初 ... [阅读全文 ]
2008-08-23
·有关发光的基本知识 基础知识 ]
一种物质由电子激发态回复到基态时，释放出的能量表现为光的发射，称为发光（luminescence）。发光可分为三种类型：光照发光、生物发光和化学发光。
1、光照发光（photoluminescence）发光剂经短波长入射光照射后进入激发态，当回复至基态时发出较长波长的可见光（见第十七章）。
2、生物发光（bioluminescence）典型例子为萤火虫发光。反应底物为萤火虫光素（fireflylu ... [阅读全文 ]
2008-08-23
·化学发光底物 基础知识 ]
在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。在发光免疫技术中常用的化学发光底物有以下几类。
1、氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物，是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺（luminol，5＇-氨基-2，3-二氢-1，4-酞嗪二酮）的分子结构及化学反应式如下：
鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。异鲁米诺衍生物 ... [阅读全文 ]
2008-08-23
·多克隆抗体的制备 基础知识 ]
一、器材
剪刀（剪兔毛用）一把、弯头眼科手术镊子（游离血管用）一把、直头眼科手术剪（剪血管用）一把，手术刀架，手术刀片，注射器（1ml、10ml，25ml）附针头，兔子固定架，灭菌三角烧瓶（200ml）或平皿（直径18cm）、弯头止血钳四把，直头止血钳两把，手术缝合线，塑料放血管，纱布等。
二、试剂
生理盐水（或PBS）
弗氏完全佐剂（Freund’s complete adjuvan ... [阅读全文 ]
2007-04-09
·DNA电泳（agarose胶） 基础知识 ]
DNA电泳 agarose胶 [阅读全文 ]
2007-04-09
·核酸电泳（DNA电泳与RNA电泳） 基础知识 ]
凝胶电泳是分子克隆的中心技术之一，DNA的凝胶电泳和RNA 电 泳
[阅读全文 ]
2008-08-21
·DNA酶解及DNA片段琼脂糖凝胶电泳 基础知识 ]
DNA酶解技术的应用
琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段原理及其操作
[阅读全文 ]
2008-08-21
·DNA的琼脂糖凝胶电泳 基础知识 ]
DNA的琼脂糖凝胶电泳 [阅读全文 ]
2008-08-20
·核酸、蛋白技术参数资料、分子量标准 基础知识 ]
一、核酸及蛋白质常用数据
1．核苷三磷酸的物理常数
化合物
分子量
λmax(pH7.0)
... [阅读全文 ]
2008-08-19
·琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA DNA电泳技术 ]
【实验目的】
通过实验掌握琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA的原理与方法。
【实验原理】
琼脂糖是从海藻中提取出来的一种杂聚多糖，是由D型和L型半乳糖以α-1，3和β-1，4糖苷键相连形成的线状高聚物（如下图所示）。琼脂糖遇冷水膨胀，溶于热水成溶胶，冷却后成为孔径范围从50nm到大于200nm的凝胶。
琼脂糖凝胶电泳是分离、鉴定和纯化DNA片段最为常用的方法之一，这种方法简便易行 ... [阅读全文 ]
2008-08-19
·脉冲场电泳仪基本操作 DNA电泳技术 ]
电泳前半小时进行以下工作：
1．检查冷凝系统，确认管道连接密闭，不漏气。
2．在电泳槽内加入约2.2升合适的电泳液。
3．接通主机和冷凝泵电源，开启主机开关，主机自检结束后，开启冷凝系统开关按“set temp”键调节需要的电泳温度，按“actual temp”显示实际温度。调节泵的速度为“100”左右。
半小时后： 4 ... [阅读全文 ]
2008-08-19
·LC-10AD岛津高效液相色谱仪使用故障及排除 基础知识 ]
高效液相色谱作为一种高效、快速的分离分析技术，具有灵敏度高、选择性好的特点，能解决医药分析领域中的诸多复杂问题。如何正确使用及排除故障，将直接影响整个高效液相色谱仪的质量和分析结果的可靠性。
本公司使用的LC-10AD岛津高效液相色谱仪，其主要由LC-10AD泵、SPD-10A紫外检测器、N2000色谱工作站组成。而故障常发生于泵和紫外检测器。
一、泵的故障及排除方法
1、泵压力变化较大或没有流动 ... [阅读全文 ]
2008-08-19
·毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE) DNA测序 ]
毛细管电泳(capillary electrophoresis CE)又叫高效毛细管电泳(HPCE) 是近年来发展最快的分析方法之一。1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离 创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等建立了胶束毛细管电动力学色谱。1987年Hjerten 建立了毛细管等电聚焦 Cohen和Karger提出了毛细管凝胶电泳 ... [阅读全文 ]
2008-08-19
·原位杂交与荧光原位杂交 Southern Blotting ]
一、原位杂交( In Situ HybridizationISH)
是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛应用于肿瘤生物学、血液病理学、遗传、微生物学、细胞和分子生物学、神经内分泌学、免疫学等领域及治疗评估和 ... [阅读全文 ]
2008-08-19
·骨髓基质细胞的原代培养 基础知识 ]
材料方法
1.材料：
1.1材料来源：取自健康成人行骨髓内固定术扩髓前收集骨髓腔内骨髓。
1.2主要试剂：
DMEM培养基
胎牛血清（FBS）
β-甘油磷酸钠（β-GP）
维生素C
青链霉素
胰蛋白酶（1:250）-EDTA
1.3主要仪器设备
双人超净台 Farma Scientific美国
单人超净台 Farma Scientific美国
二氧化碳孵箱 Far ... [阅读全文 ]
2008-08-14
·琼脂糖凝胶电泳技术 DNA电泳技术 ]
1、实验目的：
学习与掌握DNA电泳的技术方法，利用琼脂糖凝胶电泳检测DNA纯度、含量以及分子量，及分离不同大小DNA片段。
2、实验原理：
电泳概念及种类*
• 电泳： 是指带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动的现象
电泳基本原理
迁移率（或泳动度）是指带电颗粒在单位电场强度下泳动的速度，可用下列公式计算：
Ｕ =υ/E =(d/t)/(V/l) =dl/V ... [阅读全文 ]
2008-08-13
·醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质 基础知识 ]
一、目的：
学习醋酸纤维薄膜电泳的操作，了解电泳技术的一般原理。
二、原理：
带电质点在电场中移动的现象称为电泳。电泳现象早在19世纪初期就被人们发现了，并用于胶体化学中，但是电泳技术的广泛应用则在20世纪40年代左右。近年来各种类型的电泳技术发展十分迅速。例如，纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、纤维素或淀粉粉末电泳、淀粉凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。在电泳形式上更是丰富多样，有在 ... [阅读全文 ]
2008-08-13
·RAPID BIDIRECTIONAL SOUTHERN BLOT FOR CLONED DNA Southern Blotting ]
A. Process gel
1. Electrophorese sample in agarose gel 0.5 to 1 cm thick 0.5-1.2%.
2. Expose gel to UV light for 1 min on 265 nM light box (or depurinate in 2 vol of 0.25M HCl for 2X15' and rinse in d ... [阅读全文 ]
2008-08-12
·Pulsed Field Gel Electrophoresis DNA电泳技术 ]
Pulsed Field Gel Electrophoresis
Preparation of Chromosome-sized Yeast DNA Molecules in Solid Agarose
(Modified from Schwartz and Cantor CELL 37:67 1984 )
1.Grow 5 ml yeast culture in YPD Broth to &qu ... [阅读全文 ]
2008-08-12
·Posi blot transfer 基础知识 ]
Preparation of gel for Posi blot transfer
1、Cut gel to size of preexisting mask or cut new mask.
2、For depurination: put gel in pyrex dish add 500ml .25N HCl (10mL conc. HCl+450ml H2O) and shake 15min ... [阅读全文 ]
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